Thứ nhất, Actinobacteria

Actinomycetes là một quần thể sinh vật nhân sơ, phân bố rất rộng trong giới tự nhiên, là một loại tài nguyên vi sinh vật cực kỳ quan trọng, có quan hệ mật thiết với sản xuất và sinh hoạt của con người, đặc tính nổi bật chính là có thể sản sinh ra rất nhiều loại kháng sinh. Actinobacteria có thể hình thành sợi nấm phân nhánh và bào tử phân sinh, phát triển thành sợi nấm, chủ yếu bằng cách hình thành bào tử vô tính để sinh sản, cũng có thể nhân lên bằng cách chia các mảnh nấm. Actinomyces phát triển đến một giai đoạn nhất định, nơi một phần của sợi khí sinh tạo thành sợi bào tử, khi chúng trưởng thành và phân biệt thành nhiều bào tử, được gọi là phân bào tử.

Sơ đồ 1 Sơ đồ mô hình Actinobacteria

Sơ đồ 2 Sợi khí sinh và sợi bào tử của Actinobacteria

Do các bào tử rất dễ gây ra các vấn đề ô nhiễm chéo giữa các thuộc địa đơn dòng khác nhau trên cùng một tấm rắn do kích thước nhỏ, trọng lượng nhẹ và dễ bay hơi của chúng, tạo ra những thách thức lớn trong việc nuôi cấy và tách Actinobacteria.

Hệ thống nuôi cấy giọt siêu nhỏ nâng cấp thông lượng cao của sinh vật Skywood, MISS cell, có thể bao bọc các tế bào (bào tử) trong các giọt để tạo thành các đơn vị nuôi cấy độc lập, tránh sự phân tán của sợi nấm hoặc bào tử vào các đơn dòng giọt khác, do đó khắc phục vấn đề ô nhiễm chéo giữa các chủng và tăng hiệu quả và độ tinh khiết của việc đạt được đơn dòng Actinobacteria. Thí nghiệm này dựa trên sợi nấm để đạt được sự tách biệt và nuôi cấy Actinobacteria, cung cấp một phương pháp nuôi cấy tách cho việc nuôi cấy filinobacteria không sản xuất bào tử.

II. Tách Actinobacteria nuôi cấy bằng cách sử dụng tế bào MISS

1. Tiền xử lý mẫu để xác định nồng độ trên máy

Thu thập sợi nấm Actinobacteria (30 ℃, nuôi cấy trong 4 ngày), thêm các chủng thủy tinh để phá vỡ sợi lọc, thông qua bảng đếm cầu máu, pha loãng nồng độ mẫu với môi trường BM đến 500-1000 CFU/mL, quy trình làm việc như sau:

Hình 3 Quy trình xử lý mẫu

2. Nuôi cấy tách tế bào Miss

Thí nghiệm này tạo ra tổng cộng 2500 giọt, nuôi cấy 96h sau đó tiến hành phát hiện và phân loại, sau 60 phút phân loại, tổng cộng thu được khoảng 500 giọt chứa vi khuẩn, quy trình làm việc của thiết bị MISS cell như hình dưới đây.

Hình 4: Quy trình làm việc của Miss Cell

3 Kết quả thí nghiệm

1) Tỷ lệ tăng trưởng tương phản:Các điểm thời gian khác nhau để quan sát sự phát triển của Actinobacter lỏng và tấm. Sự phát triển trong giọt xuất hiện sau 1 ngày nuôi cấy giọt, sự phát triển của sợi nấm xuất hiện sau 6 ngày nuôi cấy tấm. Tốc độ tăng trưởng của Actinobacter lỏng tốt hơn đáng kể so với nuôi cấy tấm. Thời gian lựa chọn nuôi cấy tốt nhất của Actinobacter là 4 ngày.

Hình 5: Sự phát triển của Actinobacter trên một tấm phẳng rắn

Hình 6 Sự phát triển của Actinomyces trong giọt

2) Biểu đồ kết quả phân loại giọt Actinobacteria

Hình 7 Văn hóa Actinobacteria trong 4 ngày, tình trạng phân loại ở chế độ OD

Hình 8 Văn hóa Actinobacteria trong 4 ngày, phân loại trong chế độ huỳnh quang

III. Dụng cụ tế bào MISS sinh học Skywood cung cấp giải pháp tự động hóa thông lượng cao và hiệu quả cao cho quá trình tách, nuôi cấy và sàng lọc Actinobacteria

Sử dụng thiết bị tế bào MISS của sinh vật Skywood trong nghiên cứu này, tạo ra 2.500 giọt, phân loại khoảng 500 thuộc địa đơn lẻ, thực hiện nuôi cấy và phân loại tự động Actinobacteria, tránh ô nhiễm chéo giữa các chủng một cách hiệu quả. Đồng thời, một phương pháp nuôi cấy cô lập cũng được cung cấp cho các vi khuẩn tơ không sản xuất bào tử. Thí nghiệm này tiêu thụ tổng cộng 8ml môi trường, tự động hóa toàn bộ quá trình sản xuất giọt, nuôi cấy và sàng lọc vào tấm 96 lỗ, nâng cao đáng kể hiệu quả thu được đơn dòng, đồng thời tránh hiệu quả vấn đề ô nhiễm chéo, cung cấp nền tảng công cụ hiệu quả cao cho sàng lọc đơn dòng của Actinobacteria.

Thiết bị tế bào MISS Biology Skywood cung cấp nền tảng thử nghiệm tự động hiệu quả cao cho nuôi cấy đơn dòng và sàng lọc thông lượng cao cho vi khuẩn bao gồm Actinobacter có bào tử bên trong, hỗ trợ mạnh mẽ cho việc nuôi cấy và sàng lọc các chủng!