I. Giới thiệu background

Với số lượng lớn và cấu trúc phức tạp của hệ vi sinh đường ruột, thành phần và những thay đổi sinh lý của hệ vi sinh đường ruột của con người có liên quan đến một loạt các bệnh và bằng cách nghiên cứu các vi sinh đường ruột có thể hiểu rõ hơn về mối quan hệ của chúng với sức khỏe con người, hiện tại, đối với nghiên cứu này, việc tách và nuôi cấy hệ vi sinh đường ruột là rất quan trọng.

Phương thức bồi dưỡng phân tách nấm đường ruột truyền thống chủ yếu là mô hình máy tính bảng, do lượng công việc khá lớn, mô hình bồi dưỡng máy tính bảng tồn tại vấn đề tốn thời gian, tốn sức, hiệu quả thấp, hơn nữa thường thường hiệu quả bồi dưỡng không tốt.Công nghệ Micro Flow DropBáo cáo ngày càng tăng về ứng dụng trong nuôi cấy phân lập hệ vi sinh đường ruột bằng cách phân tán hệ vi sinh đường ruột đơn lẻ thành các giọt độc lập duy nhất, cung cấp không gian hạn chế chất lỏng khép kín và độc lập cho sự phát triển của từng loài, thúc đẩy đáng kể sự phát triển của vi sinh vật và tránh các chủng dễ bị tổn thương được bao phủ bởi các chủng ưu thế về tăng trưởng, do đó cải thiện các loài và số lượng vi sinh vật có thể nuôi cấy.

Thí nghiệm này tạo ra hàng chục ngàn đơn vị nuôi cấy giọt độc lập hoàn toàn tự động bằng cách sử dụng dụng cụ tế bào MISS sinh học Tiangi, phân tán vi sinh vật vào từng giọt để nuôi cấy độc lập, trong đó các cá thể vi khuẩn khác nhau có thể phát triển và nhân lên đầy đủ, đồng thời loại bỏ ảnh hưởng của sự phát triển quá mức và dân số tăng nhanh trong nuôi cấy cộng đồng.Phương pháp nuôi cấy dựa trên thiết bị tế bào MISS khắc phục rất nhiều thiếu sót trong phương pháp nuôi cấy tấm truyền thống, cung cấp nền tảng nghiên cứu quan trọng để xác định và phát hiện nhóm vi khuẩn cộng sinh đường ruột hiếm và hệ vi sinh môi trường kỵ khí.

II. Quá trình thí nghiệm nuôi cấy phân lập vi khuẩn đường ruột dựa trên thiết bị tấm và tế bào MISS

1. Tiền xử lý mẫu để xác định nồng độ trên máy

Sau khi các mẫu phân được thu thập để pha loãng, nồng độ mẫu được pha loãng đến 10.000-30.000 CFU/mL với môi trường bằng cách sử dụng bảng đếm tế bào máu, quy trình làm việc như sau:

2. Nuôi cấy tách hệ thực vật đường ruột trong môi trường kỵ khí thông qua thiết bị tế bào MISS

Thí nghiệm này tổng cộng tạo ra khoảng 20.000 giọt, sau khi nuôi cấy kỵ khí ở 37 ℃ 30 ngày để phát hiện và phân loại, sau 5 giờ phân loại, tổng cộng có khoảng 4.600 giọt chứa vi khuẩn và giải trình tự thông lượng cao, quy trình làm việc như hình dưới đây cho thấy:

3. Hệ vi sinh đường ruột được nuôi cấy bằng cách sử dụng tách tấm

Thí nghiệm này được phủ tổng cộng 15 tấm, được thu thập sau khi nuôi cấy kỵ khí ở 37 ℃ 30 ngày, và được giải trình tự thông lượng cao, quy trình làm việc như thể hiện trong hình dưới đây:

4 Kết quả thí nghiệm

(1) So với nhóm phân chưa được nuôi cấy, việc cô lập nuôi cấy bằng thiết bị tế bào MISS đã xác định được 10,9% (13/119) loài vi khuẩn (cấp độ chi), vượt trội đáng kể so với 0,8% (1/119) của đĩa phẳng.

(2) Nuôi cấy giọt làm tăng 40% sự phong phú của các loài nuôi cấy phẳng và có tác dụng làm giàu tốt hơn đối với Bifidobacterium, Peptoniphilus, Collinsella, Phascolarctobacterium, Enterococcus, Porphyromonas, v.v.

III. Dụng cụ tế bào MISS sinh học Skywood cung cấp giải pháp tự động hóa thông lượng cao và hiệu quả cao cho quá trình tách, nuôi cấy và sàng lọc vi khuẩn kỵ khí nghiêm ngặt như hệ thực vật đường ruột

Trong nghiên cứu này, công cụ tế bào MISS sinh học Skywood đã được sử dụng để tạo ra tổng cộng 20.000 giọt, phân loại khoảng 4.600 giọt đơn dòng, thực hiện nuôi cấy và phân loại tự động hệ thực vật đường ruột, đồng thời, dựa trên lợi thế của nuôi cấy giọt, tránh các vấn đề tăng trưởng cạnh tranh và ô nhiễm chéo giữa các chủng, cải thiện đáng kể sự phong phú của các loài sau nuôi cấy.

MISS cell đã thực hiện toàn bộ quá trình thí nghiệm hệ vi sinh đường ruột với thông lượng cao, hoạt động tự động, cải thiện đáng kể khả năng nuôi cấy vi sinh vật, giảm đáng kể khối lượng công việc của nhân viên thí nghiệm và nâng cao hiệu quả công việc, cung cấp nền tảng thí nghiệm tự động hiệu quả cao cho nuôi cấy đơn dòng và sàng lọc thông lượng cao, hỗ trợ mạnh mẽ cho việc nuôi cấy và sàng lọc các chủng!