Hệ thống quản lý dung môi của hệ thống sắc ký lỏng chịu trách nhiệm cung cấp pha chảy phù hợp, thường được pha trộn từ nhiều dung môi như methanol, acetonitrile, nước, v.v. Các mẫu khác nhau và nhu cầu tách yêu cầu các thành phần và pha chảy khác nhau. Ví dụ, trong sắc ký chất lỏng nghịch pha, pha chảy ảnh hưởng đến thứ tự tẩy rửa của các thành phần, và khả năng tẩy rửa của các thành phần càng yếu. Bơm đóng một vai trò quan trọng trong hệ thống quản lý dung môi, nó có thể cung cấp pha dòng chảy liên tục và ổn định, đảm bảo quá trình sắc ký diễn ra suôn sẻ. Các máy bơm thông thường có máy bơm nhị phân và máy bơm tứ phân, máy bơm tứ phân có thể trộn và vận chuyển bốn loại dung môi, có thể linh hoạt hơn để điều chỉnh thành phần pha dòng chảy.

Hệ thống lấy mẫu chịu trách nhiệm đưa mẫu cần phân tích vào cột sắc ký. Nó đòi hỏi phải kiểm soát chính xác lượng mẫu để đảm bảo tính chính xác và lặp lại của kết quả phân tích. Hệ thống sắc ký lỏng hiện đại thường sử dụng bộ nạp mẫu tự động, có thể lấy mẫu chính xác và tiêm theo quy trình đặt trước để cải thiện hiệu quả phân tích.

Cốt lõi của hệ thống tách là các cột sắc ký được lấp đầy với các pha cố định cụ thể. Các loại pha cố định khác nhau, chẳng hạn như silicone, liên kết bằng nhau, và các loại pha cố định khác nhau phù hợp để phân tích mẫu có tính chất khác nhau. Trong quá trình sắc ký, mẫu được phân phối liên tục giữa các pha cố định và dòng chảy, với các thành phần dần tách ra do lực tác dụng khác nhau từ hai pha.

Hệ thống phát hiện được sử dụng để giám sát và xác định các thành phần sau khi tách. Máy dò phổ biến là máy dò UV, máy dò huỳnh quang, v.v. Máy dò UV phân tích định lượng các thành phần bằng cách đo sự hấp thụ của mẫu đối với các bước sóng cụ thể của tia cực tím, được sử dụng rộng rãi; Máy dò huỳnh quang thì dựa trên đặc tính huỳnh quang của mẫu để phát hiện, có độ nhạy cao.

Hệ thống xử lý dữ liệu chịu trách nhiệm thu thập, xử lý và phân tích các tín hiệu đầu ra của máy dò. Nó có thể ghi lại thông tin về thời gian lưu giữ của đỉnh sắc ký, chiều cao đỉnh và diện tích đỉnh, xác định hàm lượng và độ tinh khiết của các thành phần trong mẫu bằng cách so sánh với các sản phẩm tiêu chuẩn hoặc sử dụng phần mềm có liên quan để tính toán.

Phương pháp xác định hệ thống sắc ký lỏng:

1. Kiểm tra ngoại hình và tính toàn vẹn:

- Kiểm tra tất cả các bộ phận hoàn chỉnh, bao gồm bơm truyền dịch, bộ nạp mẫu, cột sắc ký, máy dò, v.v., sự xuất hiện của các tình huống như hư hỏng, biến dạng, ăn mòn, v.v.

- Kiểm tra xem các đường ống kết nối có còn nguyên vẹn hay không, không bị hỏng, lão hóa, rò rỉ và các vấn đề khác, đảm bảo các đường ống được kết nối chặt chẽ.

2. Kiểm tra chức năng:

- Bơm truyền: Bật bơm truyền và kiểm tra xem nó có hoạt động bình thường hay không, có tiếng ồn hoặc rung động bất thường. Kiểm tra xem áp suất của máy bơm có bình thường không và liệu nó có thể hoạt động ổn định trong phạm vi áp suất đã đặt hay không. Đồng thời, kiểm tra chức năng điều chỉnh tốc độ dòng chảy của máy bơm để xem nó có thể thiết lập chính xác và ổn định đầu ra tốc độ dòng chảy khác nhau hay không.

- Bộ nạp mẫu: Đối với bộ nạp mẫu thủ công, kiểm tra xem hoạt động của nó có trơn tru hay không, kim lấy mẫu có bị tắc hoặc bị hỏng hay không, độ chính xác của mẫu có đáp ứng yêu cầu hay không. Đối với bộ tiến mẫu tự động, ngoài việc kiểm tra trạng thái của kim tiến mẫu, còn phải kiểm tra thứ tự tiến mẫu, tính chính xác và tính lặp lại của lượng tiến mẫu có bình thường hay không.

- Máy dò: Các phương pháp phát hiện khác nhau cho các loại máy dò khác nhau. Chẳng hạn như máy dò UV, để kiểm tra xem nguồn sáng của nó có phát sáng bình thường hay không, điều chỉnh bước sóng có chính xác không; Máy dò huỳnh quang phải kiểm tra xem bước sóng kích thích và bước sóng phát xạ có chính xác hay không, độ nhạy có bình thường hay không. Đồng thời, hãy kiểm tra xem đường cơ sở của máy dò có ổn định hay không và có tiếng ồn hoặc trôi dạt bất thường.

- Cột sắc ký: Kiểm tra sự xuất hiện của cột sắc ký có bị hư hỏng hay không, khớp cột có còn nguyên vẹn hay không. Kiểm tra xem nhận dạng của cột sắc ký có rõ ràng không, bao gồm thông tin về chiều dài cột, đường kính bên trong, loại chất độn và nhiều hơn nữa.

3. Kiểm tra khả năng thích ứng của hệ thống:

- Xác định số lượng tháp lý thuyết: Chọn các chất tiêu chuẩn thích hợp, chẳng hạn như naphthalene, v.v., được pha chế thành một dung dịch có nồng độ nhất định, phân tích mẫu theo các điều kiện sắc ký quy định. Dựa trên thời gian lưu giữ và chiều rộng nửa chiều cao của đỉnh sắc ký, số lượng các tấm tháp lý thuyết được tính toán để đánh giá hiệu quả tách của cột sắc ký.

- Xác định độ phân ly: Phân tích phân tách được thực hiện trong điều kiện sắc ký đã chọn bằng cách sử dụng dung dịch chuẩn hỗn hợp có chứa nhiều thành phần. Bằng cách đo các thông số như thời gian giữ lại, chiều rộng đỉnh và các thông số khác của hai thành phần liền kề, tính toán độ tách và kiểm tra xem khả năng tách của hệ thống đối với các thành phần khác nhau có đáp ứng các yêu cầu hay không.

- Kiểm tra độ lặp lại: Lấy mẫu dung dịch tiêu chuẩn có cùng nồng độ nhiều lần liên tiếp, quan sát thời gian lưu giữ, tính nhất quán của các thông số đỉnh hoặc đỉnh cao của từng mẫu để đánh giá độ lặp lại của hệ thống.