Các phương pháp xác định axit amin tự do chủ yếu là sắc ký đảo ngược có nguồn gốc từ cột trước, sắc ký trao đổi ion có nguồn gốc từ cột sau, sắc ký ion - tích hợp xung Ampe phát hiện, sắc ký lỏng - bay hơi ánh sáng phát hiện, sắc ký lỏng - khối phổ, vv, trong đó sắc ký đảo ngược có nguồn gốc từ cột trước và sắc ký trao đổi ion có nguồn gốc từ cột sau là phương pháp phổ biến để xác định axit amin. Vì sắc ký trao đổi ion có nguồn gốc sau cột chủ yếu cần máy phân tích axit amin để phát hiện, chi phí mua dụng cụ cao hơn, vì vậy, trong hầu hết các trường hợp, có thể chọn trước cột sau khi ngoại tuyến bằng tay, sau đó sử dụng sắc ký lỏng để phát hiện tách.

Thượng Hải Tongmicro Analysis Technology Co., Ltd. Đối với các vấn đề khó phát hiện phân tách axit amin, áp dụng Tongmicro EasySep ® Hệ thống sắc ký lỏng nối tiếp, kết hợp với cột phân tích axit amin Micro UNISIL AA (4,6 mm × 250 mm, 5 μm), đã đạt được phát hiện tách 17 axit amin bằng phương pháp axit amin có nguồn gốc PITC trước cột.