Chi tiết quyết định thành bại, điều này cũng đúng đối với các nhà nghiên cứu khoa học trong phòng thí nghiệm. Trong thí nghiệm bộ dụng cụ Elisa có rất nhiều chi tiết thao tác, ví dụ như cố gắng ít dùng súng trung đội, thường xuyên thay đầu súng, khi thêm mẫu từ nồng độ thấp đến nồng độ cao, bởi vì như vậy có thể giảm tỷ lệ nhảy lỗ. Mấu chốt của toàn bộ thí nghiệm là phương pháp xử lý kết quả, vậy trong bài viết kỹ thuật hôm nay, tôi mang đến cho bạn phương pháp phân tích kết quả xét nghiệm bộ dụng cụ Elisa.
①: Trong thí nghiệm ELISA, mẫu phải được làm tròn hoặc ba lỗ, sau đó tính toán giá trị OD trung bình của mỗi sản phẩm tiêu chuẩn nồng độ, hệ số biến đổi của lỗ lặp phải nhỏ hơn 20%.
②: Giá trị OD trung bình trừ giá trị OD của lỗ trống.
③: Làm các đường cong tiêu chuẩn.
Lấy giá trị OD sau khi trừ đi đáy này là trục X, nồng độ sản phẩm tiêu chuẩn là trục Y, sử dụng phần mềm vẽ bản đồ để đưa ra một phương pháp tính toán thích hợp. Chúng tôi khuyên bạn nên sử dụng phần mềm thích hợp để vẽ bản vẽ, chẳng hạn như CurveExpert 1.4. Phần mềm này có thể đưa ra nhiều phương pháp (như đường thẳng, bán logarit, logarit, phương trình bốn tham số, v.v.) và chọn một phương trình phù hợp với zui. Để kiểm tra xem một đường cong có khớp với dữ liệu trong bảng hay không, bạn có thể lấy nồng độ của sản phẩm tiêu chuẩn làm ẩn số, đưa giá trị OD tương ứng vào phương trình và tính toán nồng độ của sản phẩm tiêu chuẩn, kết quả sẽ rất gần với nồng độ thực tế (+/- 10%). Chọn đường cong có độ tương ứng cao.
Nếu tuyến tính của đường cong tiêu chuẩn là xấu, hoặc sự song song là xấu (OD của lỗ đối chứng hai lỗ) Giá trị khác nhau rất nhiều), hoặc hiện tượng nhảy lỗ, có thể gây ra bởi sự ô nhiễm lẫn nhau giữa các lỗ của tấm enzyme, sau khi rửa tấm không thể thực hiện bước tiếp theo càng sớm càng tốt, thêm mẫu hoặc các tác nhân khác khi hoạt động không đúng cách, ủ vị trí tránh ánh sáng kém hoặc che màng không được niêm phong để làm cho hơi ẩm bốc hơi, tấm enzyme lỗ hỏi thêm lượng thuốc thử khác nhau, giải pháp tương ứng là khi thêm mẫu xin hãy cẩn thận không để chất lỏng bắn tung tóe người trong một lỗ khác, rửa nhân tạo tấm cũng xin hãy cẩn thận, không để chất lỏng bắn tung tóe người trong một lỗ nhỏ khác, kịp thời thực hiện bước tiếp theo sau khi rửa tấm, khi thêm thuốc thử xin vui lòng treo vào, đừng để súng tiếp xúc với đầu Trong lỗ tấm, khi hấp thụ chất lỏng trong chai thuốc thử khác nhau, phải thay thế đầu súng một lần, xác nhận môi trường ấp trứng không truyền ánh sáng, màng che sẽ niêm phong tốt tấm enzyme, sử dụng máy gia tốc vi lượng đã được điều chỉnh, Nếu chất lỏng lưu lại một giọt trên đầu súng khi thêm vào chất lỏng, như vậy chất lỏng lưu lại trên đầu súng sau này cũng nhỏ xuống, để đảm bảo tính nhất quán của thể tích chất lỏng.