Tủ nuôi cấy ba khí tế bào bằng cách điều chỉnh chính xác nồng độ CO ₂, O₂ và N₂, cung cấp môi trường nuôi cấy in vitro cho các tế bào dán tường, tế bào gốc và các tế bào khác gần với điều kiện sinh lý trong cơ thể. Việc sử dụng đúng cách của nó liên quan trực tiếp đến độ tin cậy của dữ liệu thí nghiệm và tỷ lệ thành công của nuôi cấy tế bào, được trình bày một cách có hệ thống từ quy trình vận hành đến bảo trì:
I. Chuẩn bị trước khi sử dụng
1. Kiểm tra môi trường
Xác nhận rằng thiết bị được đặt trên mặt bàn ngang, để lại ≥30cm không gian tản nhiệt xung quanh, tránh xa nguồn nhiệt và ánh sáng mặt trời trực tiếp;
Kiểm tra xem điện áp nguồn có phù hợp với giá trị kích thước bảng tên của thiết bị hay không, dây nối đất cần được kết nối đáng tin cậy;
Kiểm tra hoạt động không tải trước khi kích hoạt để xác minh sự ổn định của hệ thống điều khiển nhiệt độ (cài đặt 37 ℃) và hệ thống điều khiển CO ₂.
2. Tiền xử lý thân tàu
Sau khi thiết bị mới hoặc ngừng hoạt động lâu dài, cần phải lau tường bên trong và khay với 75% ethanol, khử trùng bằng tia cực tím trong 30 phút;
Môi trường khí cân bằng trước: thông qua khí hỗn hợp (như 95% không khí+5% CO₂) sau khi đóng cửa hộp, hoạt động trong 2 giờ làm cho áp suất không khí bên trong ổn định.
II. Thiết lập tham số cốt lõi
1. Quản lý nhiệt độ và độ ẩm
Cài đặt nhiệt độ: Hầu hết các tế bào động vật có vú phù hợp với 37 ± 0,5 ℃, nhiệt độ thực tế được ghi lại mỗi giờ sau khi khởi động;
Kiểm soát độ ẩm: Duy trì độ ẩm bão hòa 95% ± 3%, thêm nước vô trùng vào đĩa ẩm hàng ngày, tránh nước ngưng tụ.
III. Đặc điểm kỹ thuật hoạt động
1. Mẫu được đưa vào và lấy ra
Động tác mở cửa nhanh chóng sẽ dẫn đến áp lực trong hộp đột biến đột, nên hoàn thành lưu trữ trong vòng 1 phút;
Chai/đĩa nuôi cấy cần được phân phối đồng đều trên khay để tránh chặn lỗ thông gió tuần hoàn;
Người vận hành đeo găng tay vô trùng và dụng cụ được khử trùng bằng ngọn lửa bên ngoài đèn rượu.
2. Giám sát hàng ngày
Kiểm tra các thông số thời gian thực trên màn hình hàng ngày, tập trung vào:
- Khả năng đọc cảm biến CO₂ phù hợp với cửa sổ phát hiện hồng ngoại;
- Cho dù đường cong dao động nhiệt độ vượt quá ± 0,3 ℃;
- Đường mực nước bể, bổ sung kịp thời nước tiêm khử trùng.
IV. Bảo trì và bảo trì
1. Bảo trì định kỳ
Hàng tuần: làm sạch bụi bẩn tại khe hở của con dấu cửa, kiểm tra chức năng báo động (cắt điện mô phỏng lỗi);
Hàng tháng: Hiệu chỉnh cảm biến hồng ngoại CO₂, thay thế phần tử lọc HEPA đầu vào không khí;
Hàng quý: Làm trống bể chứa máy tạo độ ẩm và khử trùng toàn bộ khoang bằng dung dịch natri hypochlorite 1%.
2. Xử lý khẩn cấp
Cắt nguồn điện chính ngay lập tức khi báo động quá nhiệt, mở van giảm áp để giảm áp suất hộp;
Thử nghiệm dừng lại khi ô nhiễm xảy ra, khử trùng khử trùng formaldehyde được thực hiện sau khi tất cả các mặt hàng được chuyển ra ngoài.
V. Những lưu ý chính
Việc chuyển đổi cửa hộp thường xuyên bị cấm, số lần quan sát được khuyến nghị ≤3 lần mỗi ngày;
Không thể xếp chồng lên nhau để lắc nhiều lớp hoặc thiết bị nặng để tránh ảnh hưởng đến việc phân phối luồng không khí;
Xả bể khi không sử dụng trong thời gian dài, đặt độ ẩm ở mức 0% và chạy bằng điện 1 giờ mỗi tháng để chống ẩm.
Việc quản lý tinh tế các bể nuôi cấy ba khí tế bào đòi hỏi phải tính đến các đặc tính của thiết bị và nhu cầu sinh học. Thông qua quy trình hoạt động đặc biệt, giám sát thông số nghiêm ngặt và bảo trì thường xuyên, chất lượng nuôi cấy tế bào có thể được cải thiện đáng kể và cung cấp một nền tảng thử nghiệm ổn định cho sàng lọc thuốc, kỹ thuật mô và các nghiên cứu khác.