Thuốc viên là một trong những loại thuốc cổ xưa của thuốc Trung Thành. Phác đồ xét nghiệm DNA của PCR đang trở thành tiêu chuẩn vàng trong việc xác định tính xác thực của thuốc Đông y, nhưng thuốc Trung Quốc chế biến do thành phần phức tạp, bao gồm chất kết dính và phụ liệu có tác dụng ức chế phản ứng PCR, dẫn đến các phương pháp xét nghiệm DNA không thể được áp dụng hiệu quả trong lĩnh vực này. Bộ dụng cụ này làm sạch hiệu quả một số thành phần ức chế PCR bằng phương pháp chiết xuất DNA tự phát triển, dẫn đến độ tinh khiết chiết xuất DNA hiệu quả. DNA chiết xuất có thể được sử dụng trực tiếp trong phản ứng PCR, cung cấp một chương trình phát hiện đáng tin cậy để xác định tính xác thực và pha trộn dược liệu.
Xử lý nứt:
Các viên thuốc được nghiền thành bột, thêm dung dịch lysis có chứa protease K (như bộ đệm CTAB), tắm nước 56 ℃ trong 1-2 giờ, phá hủy màng tế bào và làm suy giảm protein. Nếu mẫu chứa polysaccharide, có thể thêm beta-mercapoethanol để ức chế nhiễu.
Hấp phụ tinh khiết:
Phương pháp hạt từ: Trộn dung dịch nứt với hạt từ, sau khi hấp thụ DNA cụ thể, tạp chất được loại bỏ bằng dung dịch rửa có chứa muối ly dịch.
Phương pháp cột ly tâm: Ly phân lỏng persilicone màng cột, sau khi DNA liên kết, muối và sắc tố được rửa bằng ethanol.
Tẩy và kiểm tra chất lượng:
Khử DNA bằng bộ đệm TE hoặc nước vô trùng, máy quang phổ UV phát hiện tỷ lệ A260/A280 (1,8-2,0 là đủ điều kiện). Điện di quan sát tính toàn vẹn của dải, tránh bị kéo hoặc phân tán.
Chú ý:
Đeo găng tay trong suốt quá trình vận hành để tránh nhiễm enzyme DNA.
Khi hàm lượng polysaccharide cao, có thể tăng số lần giặt hoặc sử dụng phương pháp pH thấp.
Mẫu cũ cần kéo dài thời gian tách.