Silicone H Sheet Thin Lamination Sheet (SilicagelHthin Layerchromatography Plate, viết tắt TLC Board) là một công cụ phân tích phổ biến được sử dụng rộng rãi trong hóa học, dược phẩm và các lĩnh vực khác để tách và phân tích các thành phần của các chất khác nhau. Phân loại lớp mỏng (TLC) là một kỹ thuật tách dựa trên sự khác biệt trong phân phối vật chất giữa các pha cố định và dòng chảy. Dưới đây là các bước cơ bản của phương pháp thử nghiệm với tấm mỏng lớp silicone H:
Vật liệu&Thiết bị
Tấm ốp mỏng Silicone H (SilicagelHTLCplate)
Hệ thống dung môi (pha chảy, thường là hỗn hợp dung môi)
Giải pháp mẫu
Thuốc thử phun (như nước amoniac, chất phát hiện ánh sáng cực tím, v.v.)
Bể phát triển (ví dụ: máng thủy tinh)
Ống mao dẫn (đối với mẫu điểm)
Đèn UV hoặc các chất tạo màu khác (như hơi iốt để tạo màu)
Pipette, đo lường xi lanh, vv
Các bước thử nghiệm
1. Chuẩn bị bảng TLC
Cắt tấm silicone H, thường chọn kích thước phù hợp, thường là tấm nhỏ 2,5cmx7,5cm.
Sử dụng bút chì để đánh dấu nhẹ nhàng đường bắt đầu (thường là 1-2cm từ dưới cùng của bảng), nơi mẫu được lấy mẫu.
2. Chuẩn bị giải pháp mẫu
Các mẫu cần phân tích được hòa tan trong dung môi thích hợp, thường ở nồng độ từ 1-5 mg/mL. Chú ý đến khả năng tương thích của nó với pha chảy khi sử dụng dung môi.
3. mẫu điểm
Sử dụng mao mạch để cẩn thận đặt dung dịch mẫu ở vị trí bắt đầu của bảng TLC. Khi chọn mẫu, mỗi lần chọn mẫu phải đợi dung môi bay hơi sạch sẽ, tránh cho mẫu quá liều.
Nhiều mẫu có thể được lấy mẫu, nhưng giữ khoảng cách thích hợp giữa chúng để tránh sự tách biệt không đầy đủ.
4. Chuẩn bị phát triển máng và dung môi
Thêm một lượng thích hợp pha chảy (dung môi) vào bể phát triển thủy tinh. Việc lựa chọn pha chảy nên được lựa chọn dựa trên sự phân cực của vật liệu mục tiêu, các hệ thống dung môi phổ biến như n-hexane, ethyl acetate, chloroform, methanol và các hỗn hợp khác.
Bề mặt chất lỏng của dung môi phải thấp hơn vạch bắt đầu của bảng TLC để mẫu không bị hòa tan bởi dung môi.
5. Phát triển (tách biệt)
Đặt tấm TLC phủ mẫu theo chiều dọc vào rãnh phát triển, đảm bảo đáy tấm được ngâm trong dung môi nhưng không chạm vào điểm mẫu.
Cho phép dung môi tăng lên dọc theo bảng TLC, tách ra với các mẫu. Khi mặt trước của dung môi tăng lên khoảng đỉnh của tấm, nó ngừng phát triển.
Nếu cần thiết, một thiết bị ngưng tụ có thể được sử dụng để giữ hơi dung môi trong bể, làm cho quá trình phát triển đồng đều hơn.
6. Loại bỏ và sấy khô
Lấy bảng TLC ra khỏi khe phát triển và đánh dấu vị trí của mặt trước của dung môi bằng bút chì.
Đặt các tấm TLC trong không khí hoặc sử dụng lò nướng để làm khô chúng, đảm bảo dung môi hoàn toàn bay hơi.
7. Phát hiện
Nếu mẫu có đặc tính hấp thụ tia cực tím, bạn có thể chiếu trực tiếp vào bảng TLC bằng đèn UV để quan sát vị trí của các đốm riêng biệt.
Nếu mẫu không có khả năng hấp thụ tia cực tím, bạn có thể sử dụng phun thuốc thử tạo màu (ví dụ: amoniac, hơi iốt, thuốc thử chứa lưu huỳnh, v.v.) để thực hiện phản ứng tạo màu.
Các đốm khác nhau có thể được nhìn thấy bằng cách hiển thị màu hoặc dưới ánh sáng cực tím, và tốc độ di chuyển của các đốm (giá trị Rf) có thể được sử dụng để xác định vật chất.
8 Kết quả trong Analytics
Giá trị Rf (khoảng cách di chuyển điểm/khoảng cách di chuyển phía trước dung môi) được đo cho mỗi điểm riêng biệt và được phân tích bằng cách so sánh giá trị Rf của một chất tiêu chuẩn đã biết.
Lưu ý
Lựa chọn dung môi: Theo các chất khác nhau, chọn hệ thống dung môi phù hợp để đảm bảo hiệu quả tách tốt.
Số lượng mẫu và độ chính xác: Số lượng mẫu không nên quá nhiều, tránh sự hòa tan mẫu không đầy đủ hoặc đốm quá lớn dẫn đến khó phân biệt.
Phát triển độ kín của rãnh: đảm bảo rằng rãnh phát triển được niêm phong tốt và tránh sự bay hơi của dung môi quá nhanh.
Môi trường thử nghiệm: Trong quá trình thử nghiệm, tránh rung động và luồng không khí quá nhiều để không ảnh hưởng đến hiệu quả tách.
Với các bước này, bạn có thể thực hiện các thí nghiệm lớp mỏng với tấm silicone H để tách thành công và phân tích các mẫu phức tạp.