Từ cơ bản đến nâng cao: Hướng dẫn sử dụng kính hiển vi đảo ngược Leica

Về chúng tôi

Shanghai Jintong Instrument Co., Ltd

Thông tin E-mail
1415268707@qq.com
Điện thoại
13764885152
Địa chỉ
Phòng 4597, Tòa nhà 6, 1150 Lam Phong Road, Fengxian District, Thượng Hải

Ngày:2025-07-18Đọc:0

　　Kính hiển vi ngược LeicaVới cấu hình vật kính linh hoạt và thiết kế băng tải phù hợp với nhiều mẫu, nó trở thành vũ khí nghiên cứu trong các lĩnh vực nuôi cấy tế bào, cắt mô và khoa học vật liệu. Nắm vững các kỹ thuật vận hành của nó có thể nâng cao hiệu quả thí nghiệm cũng như kéo dài tuổi thọ của dụng cụ. Sau đây từ thao tác cơ sở đến kỹ xảo nâng cấp, chia thành các bước giải thích chi tiết.

Thông số kỹ thuật sản phẩm: - Type: Digital Multifunction Imaging System - Standard Functions: Copy, Print (

1. Bật nguồn và sẵn sàng môi trường

Sau khi bật nguồn, bật công tắc nguồn máy chủ kính hiển vi, đợi sau khi thị kính sáng lên, bật nguồn sáng huỳnh quang (nếu cần quan sát huỳnh quang). Lưu ý: Nguồn sáng huỳnh quang cần làm nóng trước 5-10 phút để đạt được cường độ ánh sáng ổn định, tránh chuyển đổi thường xuyên để kéo dài tuổi thọ bóng đèn.

Điều chỉnh đế kính hiển vi đến trạng thái ổn định, tránh rung động ảnh hưởng đến hình ảnh (đề nghị đặt trên bàn chống sốc hoặc đệm cao su dày).

2. Đặt mẫu và lấy nét

Đặt đĩa petri, tấm xốp hoặc slide ở giữa bệ mang và đảm bảo rằng mẫu được đặt ngay dưới mục tiêu (đối tượng kính hiển vi đảo ngược hướng lên trên và mẫu được đặt từ trên).

Lấy nét thô bằng cách sử dụng các đối tượng có độ phóng đại thấp (như 4X hoặc 10X): Từ từ hạ thấp đối tượng xuống mẫu gần bằng núm điều chỉnh thô (cẩn thận để tránh chạm vào) và quay ngược lại từ từ để hình ảnh rõ ràng. Khi chuyển đổi vật kính có độ phân giải cao (ví dụ: 20X, 40X), cần điều chỉnh núm điều chỉnh tinh tế, vì khoảng cách làm việc của vật kính ngắn, cần vận hành nhẹ nhàng hơn.

3. Đường dẫn ánh sáng và điều chỉnh hình ảnh

Điều chỉnh chiều cao của gương tập trung và kích thước khẩu độ: Khi quan sát gương tập trung thấp, vị trí của gương tập trung thấp hơn, khẩu độ mở rộng; Khi có kính nhân đôi cao cần nâng cao kính tập trung, thu hẹp các gói sáng để nâng cao độ tương phản.

Nhìn qua thị kính, điều chỉnh núm lấy nét thô/mịn để hình ảnh rõ ràng nhất và tránh làm hỏng vật kính hoặc mẫu vật bằng cách lấy nét quá mức.

Kỹ thuật nâng cao: Mở rộng chức năng và hình ảnh chính xác

1. Quan sát huỳnh quang và chuyển kênh

Để chụp ảnh huỳnh quang, trước tiên hãy đảm bảo rằng khối lọc đã được chuyển sang kênh huỳnh quang mục tiêu (ví dụ: DAPI, FITC, TRITC), hoạt động thông qua bàn xoay khối lọc ở bên cạnh kính hiển vi.

Điều chỉnh cường độ ánh sáng kích thích huỳnh quang: Tránh làm nguội huỳnh quang do quá sáng, cường độ ánh sáng có thể được tăng cường dần dần bằng núm điều chỉnh điện áp hoặc điều khiển phần mềm (nếu kết nối với máy tính), cho đến khi tín hiệu rõ ràng và tiếng ồn nền thấp.

2. Sự khác biệt so với hình ảnh DIC

Quan sát chênh lệch: Chèn vòng chênh lệch (cần phù hợp với mục tiêu, chẳng hạn như mục tiêu 10X tương ứng với vòng chênh lệch 10X), điều chỉnh vị trí bảng pha của gương tập trung, tăng cường độ tương phản của các mẫu không nhuộm (chẳng hạn như tế bào sống).

DIC (Differential Interference Contrast): Một lăng kính DIC được lắp đặt để làm nổi bật cấu trúc tinh tế của mẫu vật (ví dụ: bộ xương tế bào, rìa màng tế bào) bằng cách điều chỉnh góc phân cực lăng kính với núm điều chỉnh cường độ ánh sáng.

3. Thu thập hình ảnh và tối ưu hóa thông số

Nếu máy ảnh kỹ thuật số được kết nối, thiết lập thời gian phơi sáng, giá trị tăng thông qua phần mềm như Leica Application Suite: cần giảm thời gian phơi sáng dưới kính lúp (tránh phơi sáng quá mức), hình ảnh tế bào sống có thể tăng độ sáng thích hợp để tăng độ sáng.

Khi chụp đa kênh, cần thu thập hình ảnh trường sáng, huỳnh quang hoặc chênh lệch riêng biệt và phân tích chồng lên nhau hoặc tương phản trong phần mềm để đảm bảo các thông số phù hợp (như trường nhìn, cùng thời gian phơi sáng).

III. Bảo trì và lưu ý

1. Làm sạch vật kính: Sử dụng giấy ống kính đặc biệt hoặc thổi bong bóng để làm sạch bụi bề mặt vật kính, tránh tiếp xúc trực tiếp với ống kính; Nếu bị nhiễm chất lỏng, hãy lau nhẹ bằng ethanol khan.

2. Chăm sóc bàn vận chuyển: Tránh làm trầy xước bề mặt bàn vận chuyển bằng mẫu sắc nhọn, làm sạch môi trường còn lại hoặc chất lỏng kịp thời sau khi sử dụng.

3. Dòng chảy tắt: tắt nguồn ánh sáng huỳnh quang (cần làm mát đến nhiệt độ phòng trước khi tắt nguồn), chuyển mục tiêu đến vị trí thấp hơn (tránh áp lực lâu dài của mục tiêu cao hơn), và cuối cùng tắt nguồn chính.

　　Kính hiển vi ngược LeicaThao tác từ điều chỉnh cơ sở đến hình ảnh cấp cao, mỗi bước đều cần phải chiếu cố quy phạm và chi tiết. Nắm vững các kỹ thuật cốt lõi của nó, không chỉ có thể thu được hình ảnh chất lượng cao một cách hiệu quả, mà còn có thể phát huy đầy đủ hiệu suất của thiết bị và cung cấp hỗ trợ đáng tin cậy cho nghiên cứu khoa học và thử nghiệm.

Bài viết cuối cùng:Nguyên tắc hình ảnh kính hiển vi Olympus và kỹ thuật tối ưu hóa hình ảnh

Bài viết tiếp theo:Khi chọn mua kính hiển vi đo quang học, bạn có thể xem bài viết này trước!