Các loại tế bào khác nhau đòi hỏi các điều kiện nuôi cấy khác nhau, vì vậy cần chọn ống nuôi cấy tế bào 87050 phù hợp. Ví dụ, các tế bào dán tường cần chọn loại có tính thấm khí tốt, trong khi các tế bào lơ lửng có thể chọn loại có độ kín tốt hơn; Nhu cầu thí nghiệm khác nhau có yêu cầu khác nhau về đặc điểm kỹ thuật, vật liệu, loại nắp chai, v.v. Do đó, nhu cầu thử nghiệm cần được xem xét đầy đủ khi lựa chọn.
Các bước xác định ống nuôi cấy tế bào 87050 chủ yếu bao gồm các khía cạnh sau:
1. Giai đoạn chuẩn bị
- Chọn ống nuôi cấy thích hợp: Chọn ống nuôi cấy tế bào có kích thước và loại phù hợp theo nhu cầu thí nghiệm như ống ly tâm thông thường, chai nuôi cấy tế bào, v.v.
- Vệ sinh&khử trùng: Đảm bảo ống nuôi sạch sẽ và không gây ô nhiễm, có thể được tiệt trùng bằng nồi hấp nhiệt độ cao hoặc xử lý nhiệt khô.
- Chuẩn bị thuốc thử: bao gồm môi trường nuôi cấy tế bào (cần làm nóng trước đến nhiệt độ thích hợp, thường chọn một phần môi trường làm nóng trước để tiết kiệm thời gian và tránh suy thoái protein), enzyme tụy (dùng để tiêu hóa tế bào), huyết thanh (cung cấp chất dinh dưỡng cần thiết cho sự phát triển của tế bào), v.v.
2. Tiêm phòng tế bào
- Số lượng tế bào: Nếu cần kiểm soát chính xác số lượng tế bào được tiêm, trước tiên nên tiến hành đếm tế bào, sử dụng bảng đếm tế bào hoặc máy đếm tế bào tự động để xác định mật độ của dịch đình chỉ tế bào.
- Tiêm tế bào: chuyển một lượng vừa phải đình chỉ tế bào vào ống nuôi cấy, lắc nhẹ để phân phối tế bào đều.
3. Quá trình nuôi cấy
- Đưa vào môi trường nuôi cấy: Đặt ống nuôi cấy đã được cấy tế bào vào môi trường nuôi cấy tế bào, đặt nhiệt độ thích hợp (thường là 37 ° C), độ ẩm (thường là 40-60) và nồng độ CO? (thường là 5).
- Quan sát thường xuyên: Theo dõi tình trạng tăng trưởng của tế bào theo thời gian hàng ngày, bao gồm hình thái tế bào, tình trạng dán tường, có ô nhiễm hay không, v.v. Kiểm tra chi tiết hơn có thể được thực hiện bằng cách quan sát trực tiếp bằng mắt thường hoặc bằng kính hiển vi.
4. Xử lý và thu thập tế bào
- Thay đổi chất lỏng: Thay đổi môi trường tươi thường xuyên để cung cấp dinh dưỡng đầy đủ và loại bỏ các chất chuyển hóa và tế bào chết, tùy thuộc vào tình trạng tăng trưởng tế bào và nhu cầu thử nghiệm.
Chuyển giao: Khi tế bào phát triển đến một mật độ nhất định (thường là 70-80 độ hợp nhất), cần phải chuyển giao. Các tế bào được tiêu hóa bằng cách sử dụng enzyme tụy để chúng rơi ra khỏi đáy ống nuôi cấy, sau đó thêm môi trường tươi để chấm dứt tiêu hóa, thổi vào đình chỉ tế bào đơn và được đưa vào ống nuôi cấy mới để tiếp tục nuôi cấy.
- Thu thập tế bào: Để tiến hành phân tích hoặc thí nghiệm thêm về tế bào, có thể sử dụng máy ly tâm để kết tủa tế bào, sau khi loại bỏ chất lỏng trên để thu thập kết tủa tế bào.