Chuẩn bị trước khi tái sinh

　　cột sắc ký lỏng ultraVới việc chuẩn bị thuốc thử: chuẩn bị nước siêu tinh khiết, methanol, acetonitrile, isopropanol và các dung môi cấp sắc ký khác, cũng như chai thu gom chất thải phù hợp; Đảm bảo rằng không có rò rỉ từ cơ thể bơm sắc ký lỏng, van mẫu.

Kiểm tra cột sắc ký: trước khi tái sinh ghi lại hiệu ứng cột hiện tại của cột sắc ký, dữ liệu hình đỉnh, nếu trong cột có dư lượng chất ô nhiễm được lưu giữ mạnh, trước tiên cần đánh giá cột sắc ký có giá trị tái tạo hay không.

Hoạt động an toàn: đeo găng tay, kính bảo hộ khi vận hành, tránh tiếp xúc với da bằng dung môi hữu cơ; Đảm bảo thông gió phòng thí nghiệm tốt.

B5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)

Flushing Flow pha dư

Loại bỏ các cột sắc ký và rửa bằng nước siêu tinh khiết với tốc độ dòng chảy thấp (0,2-0,3 mL/phút) trong 30-60 phút, loại bỏ các tạp chất hòa tan trong nước như muối đệm và ngăn chặn sự kết tủa của muối từ các chất độn gây tắc nghẽn.

Nếu pha lưu lượng có chứa thuốc thử ion, cần rửa bằng dung dịch methanol 50% trong 1-2 giờ trước khi chuyển sang methanol tinh khiết.

Loại bỏ các chất gây ô nhiễm kỵ nước mạnh

Lần lượt rửa các cột sắc ký bằng 100% methanol, 100% acetonitrile, duy trì tốc độ dòng chảy 0,3-0,5 mL/phút, mỗi dung môi có thể tích rửa gấp 20-30 lần thể tích cột.

Nếu chất gây ô nhiễm ngoan cố, bạn có thể chọn rượu isopropyl để rửa (chú ý độ nhớt rượu isopropyl cao, cần giảm tốc độ dòng chảy để ngăn chặn áp lực cột quá cao), sau khi rửa bằng methanol chuyển tiếp.

Làm sạch chất gây ô nhiễm phân cực

Đối với các cột sắc ký có chứa tạp chất phân cực, rửa sạch bằng hỗn hợp methanol-nước (1: 1) trong 60 phút và sau đó rửa sạch bằng methanol tinh khiết đến đường cơ sở.

Cân bằng sau khi tái sinh

Cột sắc ký được cân bằng bằng pha dòng chảy của phương pháp phân tích mục tiêu với thể tích cân bằng không dưới 10 lần thể tích cột cho đến khi đường cơ sở ổn định trước khi phân tích mẫu được thực hiện.

III. Ghi chú tái tạo cột sắc ký loại đặc biệt

Cột sắc ký dương: chống rửa bằng dung môi chứa nước, lần lượt rửa bằng n-hexane, dichloromethane, ethyl acetate khi tái sinh và cuối cùng được bảo quản bằng cân bằng n-hexane.

Cột sắc ký trao đổi ion: trước tiên rửa bằng dung dịch đệm tương ứng với pH, sau đó rửa bằng nước khử ion đến trung tính, cuối cùng bảo quản bằng dung dịch đệm chứa 5% methanol.

Cột sắc ký chiral: Ưu tiên sử dụng dung môi tái tạo được khuyến nghị của nhà sản xuất, tránh sử dụng dung môi phân cực mạnh, ngăn chặn sự phá hủy pha cố định chiral.

IV. Xác minh và bảo quản sau khi tái tạo

Xác minh hiệu suất:cột sắc ký lỏng ultraSau khi hoàn thành tái sinh, tiêm các sản phẩm tiêu chuẩn để kiểm tra hiệu ứng cột, tính đối xứng của đỉnh, nếu cải thiện hình dạng đỉnh, hiệu ứng cột khôi phục lại hơn 80% mức ban đầu, cho thấy tái sinh thành công.

Bảo quản lâu dài: Cột sắc ký ngược được bảo quản bằng niêm phong methanol tinh khiết, cột sắc ký dương được bảo quản bằng n-hexane, thắt chặt đầu ở cả hai đầu và đặt trong môi trường nhiệt độ bình thường, tránh ánh sáng.