Phương pháp thí nghiệm của chuột tránh bóng tối
Chuẩn bị thí nghiệm
Làm quen với môi trường: 2 thiên thần đầu thí nghiệm, chuột làm quen với môi trường phòng thí nghiệm, ăn uống tự do, uống nước.
Thiết kế nhóm: Được thiết kế theo các nhóm vùng ngẫu nhiên phân tầng, làm cho các nhóm động vật có cân nặng trung bình và tỷ lệ giới tính tương tự nhau. Những con chuột thí nghiệm được chia thành 3 nhóm theo các phương pháp huấn luyện: Single Adaptation One Shock (MOS), Single Adaptation Limited Training (MOL), Multiple Adaptation Limited Training (MUL), mỗi nhóm được chia thành 2 nhóm nhỏ là Control (C) và Model (M), và cuối cùng là 6 nhóm (mỗi nhóm n=9).
Thiết lập dụng cụ: Thiết bị tránh bóng tối chia làm hai phòng sáng và tối, ở giữa có một lỗ tròn đường kính 3 cm, đáy hai phòng đều trải hàng rào đồng. Lưới đồng dưới cùng của buồng tối có thể được cấp nguồn, điện áp được điều chỉnh bằng nút, thường là 40V, 50Hz.
Phương pháp đào tạo
Phương pháp MOS: Huấn luyện hoàn thành trong vòng một ngày, trước tiên cho chuột vào máy tránh bóng tối thích ứng với môi trường 3 phút, khi huấn luyện đưa chuột quay lưng về phía cửa động để vào trong phòng sáng, vào trong phòng tối bị điện giật là lấy ra.
Phương pháp MOL: Đào tạo được thực hiện trong một ngày, chuột thích nghi với môi trường 3 phút và đào tạo 3 phút.
Phương pháp MUL: 3 ngày liên tiếp cho chuột vào máy tránh bóng tối để thích nghi với 3 phút, ngày thứ ba sau khi thích nghi hoàn thành thì bắt đầu huấn luyện, sau 3 phút thì lấy ra. Thích nghi với môi trường và huấn luyện chuột khi đó tự do qua lại giữa phòng sáng và phòng tối, người đi vào thời gian ủ bệnh lớn hơn 3 phút thì bỏ đi không dùng.
Phương pháp kiểm tra
Chỉ số ghi âm: Sau khi hoàn thành khóa đào tạo 24h, chuột được đưa trở lại buồng sáng để ghi lại thời gian cần thiết cho lần đầu tiên vào phòng tối, đó là số lần đi vào phòng tối trong thời gian ủ bệnh (STL) và 5 phút, số lỗi (ET). Nếu chuột không vào phòng tối trong vòng 5 phút, STL được ghi là 300 và ETs được ghi là 0.
Lưu ý
Môi trường thử nghiệm
Dọn dẹp môi trường: Trước và sau thí nghiệm chú ý dọn dẹp chất thải động vật nhấp vào hàng rào, chất thải sẽ ảnh hưởng đến tính thông điện. Bằng cách lau, sấy khô rượu để loại bỏ mùi động vật trước đó, thiết bị dụng cụ cần có hệ thống thông gió.
Giảm nhiễu: Trong quá trình thí nghiệm phải duy trì tất cả các thủ tục thí nghiệm nhất quán, chẳng hạn như che chắn tiếng ồn, giảm kích thích mùi, điều chỉnh ánh sáng, v.v., môi trường thí nghiệm nên yên tĩnh và tối, cố gắng lấy động vật nhẹ nhất có thể, giảm kích thích động vật. Hãy nhẹ nhàng khi đóng cửa giữa hai hộp và không tạo ra quá nhiều âm thanh bên ngoài ảnh hưởng đến hành vi của động vật.
Hoạt động thử nghiệm
Động vật thích nghi: 3-7 ngày trước khi bắt đầu thí nghiệm, mỗi ngày lấy, vuốt ve động vật, để nó thích nghi với việc bị nhân viên thí nghiệm bắt, tránh trong quá trình thí nghiệm do nhân viên thí nghiệm bắt lấy gây ra động vật trong trạng thái căng thẳng, gây ra vấn đề kết quả thí nghiệm không đáng tin cậy.
Các thông số sốc: 0,65-1,8mA (0,8mA được khuyến nghị) hoặc điện áp 65-70V cho chuột; 0,15-0,6mA (0,25mA được khuyến nghị) hoặc điện áp 30-36V với tần số 5-15Hz hiện tại.
Bảo trì thiết bị: Lưới đồng ở dưới cùng của dụng cụ thí nghiệm dễ bị rỉ sét, dẫn đến tăng điện trở. Trước mỗi thí nghiệm, nó nên được đánh bóng mịn bằng giấy nhám.