Máy tổng hợp mồi là thiết bị cốt lõi của phòng thí nghiệm sinh học phân tử và hoạt động hiệu quả và ổn định của nó là rất quan trọng đối với các thí nghiệm. Ba loại lỗi phổ biến nhất là tắc đường, rò rỉ van và dữ liệu tổng hợp bất thường. Bài viết này sẽ cung cấp một phân tích ngắn gọn về điều này và cung cấp một giải pháp nhắm mục tiêu.
I. Đường ống bị tắc
Đây là một thất bại phổ biến, trực tiếp dẫn đến thất bại tổng hợp.
Chẩn đoán: thường đi kèm với sự gia tăng bất thường của áp suất cột, phân phối thuốc thử kém, sản lượng cuối cùng rất thấp hoặc không có sản phẩm.
Nguyên nhân và giải pháp chính:
Tắc nghẽn cột tổng hợp: xảy ra thường xuyên nhất. Gây ra bởi sự kết tủa của dung dịch monomer hoặc base, làm khô lớp trụ hoặc các hạt rắn. Giải pháp: Làm gián đoạn quá trình tổng hợp ngay lập tức, rửa ngược hoặc chuyển tiếp cột tổng hợp và đường thượng nguồn bằng dung môi khử chặn mạnh như acetonitrile, dung dịch TCA/dichloromethane cô đặc. Hàng ngày cần đảm bảo thuốc thử tươi, không có nước, sau khi tổng hợp rửa sạch.
Đường ống hoặc van bị chặn vi mô: áp suất đường ống thuốc thử cụ thể cao. gây ra bởi sự kết tinh hoặc suy thoái. Giải pháp: Thực hiện quy trình làm sạch "Purge" cho các tác nhân cụ thể hoặc tháo rời thủ công các khối van liên quan và đường mao dẫn.
Thứ hai, rò rỉ van và đường ống
Rò rỉ dẫn đến đo lường tác nhân không chính xác, ô nhiễm chéo và thậm chí làm hỏng thiết bị.
Chẩn đoán: áp suất không thể thiết lập hoặc giảm liên tục, tích tụ chất lỏng xung quanh cột phản ứng, năng suất tổng hợp thấp và "thiếu" hoặc pha trộn sai trong chuỗi.
Nguyên nhân và giải pháp chính:
Vòng đệm bị lão hóa hoặc mòn: Vòng đệm rôto hoặc vòng đệm chung của van (đặc biệt là van phân phối chính) là điểm rò rỉ phổ biến nhất. Giải pháp: Thay thế tất cả các vòng đệm quan trọng một cách phòng ngừa thường xuyên theo lịch trình bảo trì. Khi phát hiện rò rỉ, tắt máy ngay lập tức, tham khảo hướng dẫn sử dụng để thay thế các bộ phận niêm phong tương ứng.
Các kết nối lỏng lẻo hoặc vỡ: Kiểm tra các khớp ferrule riêng lẻ để xem các mao mạch Teflon có nếp nhăn hoặc vết nứt hay không. Giải pháp: Buộc lại hoặc thay thế các đường bị hỏng.
III. Dữ liệu tổng hợp bất thường
Biểu hiện là năng suất thấp, độ tinh khiết kém (đặc biệt là các mồi chuỗi dài không thành công), nhưng thiết bị không báo động.
Chẩn đoán: Phân tích HPLC/khối phổ cho thấy sản phẩm không chính xác, nhiều chuỗi cắt ngắn hoặc năng suất toàn bộ chiều dài thấp hơn nhiều so với dự kiến.
Nguyên nhân và giải pháp chính:
Vấn đề tác nhân (phổ biến nhất): sự suy thoái của dung dịch monomer (đặc biệt là monomer G), sự thất bại của chất kích hoạt hoặc chất oxy hóa, hàm lượng nước acetonitrile vượt mức. Giải pháp: Quản lý chặt chẽ các tác nhân, thay đổi chất hút ẩm thường xuyên bằng các tác nhân tươi, có độ tinh khiết cao, khan và acetonitrile.
Hiệu quả tách/tách thấp: Không đủ nồng độ chất lỏng tách hoặc thuốc thử cắt/tách cuối cùng, chẳng hạn như nước amoniac đậm đặc, hoặc đặt sai thời gian. Giải pháp: Đảm bảo rằng tác nhân được pha chế chính xác và xác minh rằng quy trình phản ứng khử bảo vệ là đầy đủ.
Lỗi phần mềm hoặc tham số: Mặc dù hiếm, trình tự tổng hợp sai hoặc tham số vòng lặp có thể dẫn đến thất bại hệ thống. Giải pháp: Kiểm tra cẩn thận các tập tin trình tự và cài đặt tham số tổng hợp trước mỗi tổng hợp.
Kết luận: Phòng ngừa tốt hơn chữa bệnh. Thiết lập kế hoạch bảo trì phòng ngừa thường xuyên (chẳng hạn như rửa hàng tháng, thay thế vòng đệm hàng quý, theo dõi ngày hết hạn của thuốc thử) và duy trì nhật ký làm việc chi tiết là một chiến lược hiệu quả để giảm thiểu sự cố và đảm bảo thành công và chất lượng tổng hợp mồi. Khi gặp phải vấn đề phức tạp, kỹ sư thiết bị nên được liên hệ kịp thời.