Máy nghiền tế bào siêu âm là một thiết bị thí nghiệm thường được sử dụng, chủ yếu được sử dụng trong các hoạt động như phá vỡ tế bào, lysis, phá vỡ mô, chiết xuất DNA/RNA, chiết xuất protein, v.v. Nó hoạt động bằng cách gây ra sự phá vỡ vật lý của các tế bào hoặc mô bằng sóng cơ học tần số cao được tạo ra bởi rung động siêu âm. Dưới đây là cách sử dụng máy nghiền tế bào siêu âm, bao gồm chuẩn bị thiết bị, các bước vận hành và các biện pháp phòng ngừa:
1. Chuẩn bị thiết bị
Kiểm tra thiết bị: Trước khi sử dụng, hãy kiểm tra trạng thái làm việc của máy nghiền tế bào siêu âm để đảm bảo thiết bị hoạt động bình thường. Kiểm tra dây nguồn, đầu dò siêu âm, hệ thống làm mát (nếu có) trong tình trạng tốt.
Làm sạch đầu dò: Làm sạch đầu dò để ngăn chặn các chất ô nhiễm từ thí nghiệm trước ảnh hưởng đến kết quả thí nghiệm tiếp theo. Đầu dò có thể được lau bằng ethanol khan.
Các mẫu được chuẩn bị sẵn sàng để xử lý, thường cần phải trộn mẫu với một lượng dung dịch nứt thích hợp, chẳng hạn như bộ đệm PBS, đảm bảo mẫu có thể phân tán đều khi sonication.
2. Thiết lập các thông số
Chọn tần số thích hợp: Máy hủy tế bào siêu âm thường có các lựa chọn tần số khác nhau. Nói chung, tần số phổ biến là 20kHz, 25kHz, v.v. Bản chất của mẫu và mục đích thử nghiệm nên được xem xét khi lựa chọn tần số.
Đặt công suất và thời gian: Đặt công suất và thời gian thích hợp theo bản chất của mẫu. Thông thường, công suất thiết lập dao động từ 30% đến 80% và thời gian thay đổi từ 5 giây đến 2 phút. Chúng tôi khuyên bạn nên bắt đầu với công suất thấp hơn và thời gian ngắn hơn để tránh vỡ quá mức.
Công suất quá cao: Có thể dẫn đến việc làm nóng quá mức mẫu hoặc hiện tượng bọt xảy ra.
Quá lâu: Nó có thể dẫn đến sự tích tụ nhiệt quá mức có thể ảnh hưởng đến hoạt động của protein và enzyme trong tế bào.
Thiết lập chế độ làm việc liên tục: Hoạt động liên tục thường được sử dụng để tránh các mẫu quá nóng, đặc biệt là khi làm việc ở công suất cao. Cài đặt phổ biến là: 5 giây làm việc, 5 giây dừng.
3. Các bước hoạt động
Kết nối đầu dò: Kết nối đầu dò siêu âm chắc chắn với máy phát siêu âm của máy hủy tế bào siêu âm. Đảm bảo rằng kết nối giữa đầu dò và thiết bị là chặt chẽ.
Đặt mẫu: Đặt mẫu cần xử lý trong thùng chứa thích hợp. Các thùng chứa thường được sử dụng là ống polycarbonate trong suốt hoặc cốc nhỏ, kích thước của thùng chứa phải phù hợp với kích thước của đầu dò.
Khởi động hệ thống làm mát (nếu có): Một số máy nghiền tế bào siêu âm yêu cầu làm mát bằng nước hoặc lưu thông chất làm mát để tránh quá nóng. Đảm bảo hệ thống làm mát hoạt động đúng theo hướng dẫn của thiết bị.
Khởi động thiết bị: Sau khi nhấn nút khởi động, thiết bị bắt đầu hoạt động. Chú ý đến trạng thái hoạt động của thiết bị và đảm bảo không có tiếng ồn hoặc rung động bất thường.
Tăng dần công suất và thời gian: Bắt đầu với công suất thấp hơn và dần dần điều chỉnh để phù hợp với công suất và thời gian. Sau mỗi thời gian xử lý, tạm dừng thiết bị và kiểm tra mức độ vỡ của mẫu.
Hoạt động liên tục: Nếu mẫu quá nóng trong quá trình hoạt động hoặc tạo bọt khí, hãy tạm dừng sonication và để mẫu nguội.
Kết thúc điều trị: dừng sonication khi mẫu đạt đến mức độ mong muốn của sự phá vỡ.
4. Thu thập mẫu
Dừng thiết bị: Nhấn nút dừng để đóng thiết bị sau khi máy hủy tế bào siêu âm đã hoàn thành việc xử lý.
Làm sạch đầu dò: Sau khi đầu dò được lấy ra, đầu dò siêu âm được làm sạch bằng ethanol khan hoặc dung môi thích hợp.
Lấy mẫu: Lấy mẫu ra khỏi thùng chứa để chuẩn bị phân tích hoặc xử lý tiếp theo.
5. Dọn dẹp và chăm sóc
Thiết bị làm sạch: Sau mỗi thí nghiệm, làm sạch thiết bị kịp thời, đặc biệt là đầu dò và thùng chứa, để tránh dư lượng mẫu ảnh hưởng đến hiệu suất thiết bị hoặc làm ô nhiễm các mẫu tiếp theo.
Bảo trì thường xuyên: Thường xuyên kiểm tra cáp, đầu dò, hệ thống tản nhiệt của thiết bị, v.v., để giữ cho thiết bị hoạt động tốt. Thay thế đầu dò siêu âm hoặc làm sạch hệ thống làm mát khi cần thiết.
6. Thận trọng
Tránh quá nóng: Siêu âm nghiền có thể gây ra các mẫu quá nóng, đặc biệt là khi có công suất cao và thời gian xử lý kéo dài. Chế độ làm việc liên tục được khuyến khích và nhiệt độ mẫu được kiểm tra thường xuyên trong quá trình xử lý.
Tránh ô nhiễm chéo: Đối với các mẫu khác nhau, các đầu dò khác nhau nên được sử dụng hoặc làm sạch để tránh ô nhiễm chéo.
Bảo vệ thính giác: Máy hủy tế bào siêu âm tạo ra tiếng ồn lớn khi hoạt động, vì vậy bạn nên đeo bịt tai hoặc nút tai khi vận hành để bảo vệ thính giác.
Ngăn chặn sự hình thành bong bóng: Tránh tạo ra quá nhiều bong bóng khi vận hành, điều này có thể ảnh hưởng đến hiệu quả nghiền. Có thể chọn công suất thấp hơn hoặc thời gian gián đoạn dài hơn.