Ánh sáng phân cực tuyến tính phát ra từ nguồn quang phổ nhị sắc tròn rung là cơ sở. Sau đó, nó được chia thành các phân cực tròn xoay trái và phải với sự trợ giúp của các thành phần quang học cụ thể, chẳng hạn như một phần tư của các tấm sóng. Hướng phân cực của hai loại ánh sáng phân cực tròn di chuyển theo chu vi, nhưng quay theo hướng ngược lại. Khi hai chùm ánh sáng phân cực tròn này đi qua các mẫu có chiral, có sự khác biệt trong sự hấp thụ của chúng đối với các phân tử chiral trái và phải do cấu trúc đặc biệt của chúng. Sự khác biệt hấp thụ này chính là nguồn gốc của tín hiệu nhị sắc tròn. Thiết bị thu thập thông tin về mẫu bằng cách phát hiện sự kém hấp thụ này. Máy dò trong thiết bị sẽ nắm bắt sự thay đổi cường độ ánh sáng sau khi đi qua mẫu và biến nó thành tín hiệu điện. Những tín hiệu điện này sau đó trải qua một loạt xử lý và phân tích, tạo ra biểu đồ nhị sắc ký tròn. Bằng cách giải mã bản đồ này, các chi tiết như cấu trúc thứ cấp của các phân tử trong mẫu, quá trình gấp và tương tác có thể được suy ra.

Máy quang phổ hai màu tròn rung (VCD) là một công cụ quan trọng để nghiên cứu cấu hình phân tử và hoạt động quang học của vật liệu chiral. Đây là các bước xác định của nó:

1. Hiệu chuẩn dụng cụ: Hiệu chuẩn dụng cụ được thực hiện bằng dung dịch tiêu chuẩn để xác định bước sóng hấp thụ và cường độ của ánh sáng phân cực tròn trái và phải. Điều này là để đảm bảo tính chính xác của các phép đo tiếp theo.

2. Chuẩn bị mẫu: mẫu được hòa tan hoặc chuẩn bị thành dạng dung dịch để phân tích phổ nhị sắc tròn. Việc lựa chọn dung môi phù hợp là rất quan trọng để đảm bảo rằng dung môi không can thiệp vào thử nghiệm VCD hoặc tác động của nó có thể được loại bỏ bằng cách xử lý dữ liệu tiếp theo. Đối với mẫu rắn, nó có thể ở dạng viên nén, màng rắn hoặc màng phun; Nếu là mẫu phân tử nhỏ của dung dịch, phạm vi bể đo màu thường là 100 μm, dung môi điển hình bao gồm CCl2, CDCl2, DMSO-D2, v.v.

3. Xác định mẫu: Tiêm dung dịch mẫu đã chuẩn bị vào phòng mẫu, sau khi bắt đầu nguồn sáng, máy dò bắt đầu phát hiện sự khác biệt hấp thụ mẫu đối với các ánh sáng phân cực khác nhau. Ở nhiệt độ cụ thể, dữ liệu liên quan được thu thập bằng cách thay đổi trạng thái phân cực của ánh sáng. Ví dụ, đối với thử nghiệm rắn, nên sử dụng giá đỡ mẫu xoay để loại bỏ tín hiệu giả VCD do khúc xạ kép, v.v.

4. Thu thập dữ liệu: Ghi lại tín hiệu điện đầu ra của máy dò, do đó có được một bản đồ nhị sắc ký tròn của mẫu. Bản đồ này phản ánh các đặc điểm hoạt động quang học của mẫu ở các bước sóng khác nhau.

5. Xử lý và phân tích dữ liệu: trước tiên loại bỏ tiếng ồn nền và các yếu tố gây nhiễu khác, sau đó sử dụng phần mềm đặc biệt để xử lý khử tích chập đường quang phổ, để có được cường độ và tần số của từng chế độ rung. Kết quả cuối cùng được so sánh với các mô hình lý thuyết để suy ra cấu trúc và thông tin động của mẫu. Nếu một mẫu xác định cấu hình không xác định được, so sánh phổ thử nghiệm VCD đo được với phổ tính toán VCD được tính toán bằng cách định lượng cấu hình tuyệt đối mặc định, nếu cả hai tương ứng, bạn có thể xác định cấu hình không xác định là cấu hình mặc định.