Cột chiết pha rắn là một công cụ quan trọng để xử lý tiền mẫu trong phòng thí nghiệm, nhưng nó thường phải đối mặt với nhiều thách thức thất bại trong quá trình vận hành. Sau đây là các phân loại sự cố thường gặp và các giải pháp nhằm vào:
1. vấn đề thu hồi thấp
Không đủ mục tiêu
Hiện tượng: thí nghiệm đánh dấu trống cho thấy dư lượng vật liệu mục tiêu trong chất lỏng mẫu/dung dịch rửa trên vượt quá 5%.
Lý do: Việc lựa chọn cột SPE không đúng cách (ví dụ: không phù hợp với phân cực), chất độn không đồng đều hoặc lão hóa, độ pH của dung dịch mẫu không được điều chỉnh dẫn đến sự phân ly bất thường của vật liệu mục tiêu.
Giải pháp: Thay thế chất hấp phụ chọn lọc mạnh hơn; Tối ưu hóa giá trị pH mẫu; Đảm bảo kích hoạt các thông số kỹ thuật quy trình.
Rửa không đầy đủ
Hiện tượng: nồng độ mục tiêu trong chất tẩy rửa thấp hơn giá trị lý thuyết và vẫn không cải thiện sau khi tăng thể tích tẩy rửa.
Lý do: dung môi rửa không đủ mạnh, khối lượng rửa quá nhỏ hoặc sự hấp phụ không thể đảo ngược của vật liệu mục tiêu và chất độn.
Giải pháp: Chuyển sang dùng chất tẩy rửa có tính cực mạnh hơn; Phân lần tẩy rửa nâng cao hiệu suất; Thay thế chất độn có tính kỵ nước yếu.
Thứ hai, tái tạo kém và giảm độ chính xác
Yếu tố hoạt động
Tốc độ dòng chảy không kiểm soát: Tốc độ dòng chảy>1mL/phút sẽ dẫn đến chuyển khối không đầy đủ, cần kiểm soát chặt chẽ việc kích hoạt, tốc độ dòng chảy giai đoạn trên ≤2mL/phút.
Cột khô: Sau khi tiền xử lý không kịp thời làm cho chất độn lộ ra không khí, phải kích hoạt lại và tránh hút khô.
nhiễu ma trận
Cường độ ion/dao động pH: Các mẫu phức tạp cần được thêm vào hệ thống duy trì muối đệm ổn định, ức chế sự hấp thụ cạnh tranh của tạp chất.
Sự can thiệp của dòng chảy chung: sử dụng tẩy gradient để thiết lập đường cong ngâm, tách chính xác các mục tiêu và tạp chất.
III. Hiệu quả làm sạch kém
Tỷ lệ loại bỏ tạp chất thấp
Lựa chọn chế độ sai: Chế độ khử nhiễm của vật thể mục tiêu được ưu tiên giữ lại, tính chọn lọc độc quyền của nó tốt hơn chế độ giữ lại tạp chất.
Chất độn bị vô hiệu hóa: Cột không được kích hoạt bằng chất tẩy rửa mạnh, dẫn đến dư lượng tạp chất. Khi hoạt hóa cần rửa sạch cột phản xạ bằng cồn methanol tinh khiết.
Hiệu ứng dựa trên rượu siliconophilic
Biểu hiện: Các hợp chất kiềm kết hợp với các nhóm hydroxyl silic còn sót lại gây ra sự chậm trễ.
Biện pháp đối phó: Điều chỉnh độ pH của chất tẩy rửa để axit, hoặc thêm thuốc thử amin cạnh tranh để ngăn chặn hành động liên kết hydro.
IV. Tốc độ dòng chảy bất thường và tắc nghẽn cột
Vật lý tắc nghẽn
Ô nhiễm hạt: Mẫu chứa các hạt không hòa tan, cần ly tâm hoặc lọc trước khi xử lý.
Độ nhớt quá cao: mẫu pha loãng làm giảm lực cản dòng chảy.
Lỗi nạp
Bong bóng/khe hở: Giường nhồi có chiều cao bất thường và cần phải lắp lại chất độn.
V. Lỗi vận hành thiết bị
Áp suất bất thường
Báo động áp suất cao: Hầu hết do tắc nghẽn đường ống hoặc sự tích tụ của lưới lọc đầu ra, nên dừng lại để làm sạch.
Rò rỉ áp suất thấp: Kiểm tra độ mòn của vòng kín và thay thế các thành phần niêm phong kịp thời.
Hệ thống điều khiển không hoạt động
Lỗi phần mềm: khởi động lại thiết bị và cập nhật firmware; Nếu không có hiệu quả thì liên hệ với nhà máy sửa chữa bảng mạch.
Chẩn đoán sự cố của cột chiết xuất cố định cần kết hợp với hiện tượng thí nghiệm và kiểm tra mang tính hệ thống. Bảo trì định kỳ (chẳng hạn như thay thế miếng đệm, làm sạch ống lót) có thể làm giảm đáng kể tỷ lệ thất bại. Đối với các vấn đề phức tạp, bạn nên tham khảo hướng dẫn mã lỗi của hướng dẫn sử dụng thiết bị hoặc sử dụng chiến lược song song hai cột để xác minh hiệu suất tách.