Dưới đây là một mô tả chi tiết về cách cột sắc ký lỏng được cài đặt:

Chuẩn bị trước

- Kiểm tra trạng thái dụng cụ: bật sắc ký lỏng để xác nhận rằng hệ thống không có dấu hiệu báo động và các bộ phận hoạt động bình thường. Đặc biệt chú ý đến sự ổn định áp suất của máy bơm và sự ổn định cơ bản của máy dò, đây là điều kiện tiên quyết cho việc lắp đặt và sử dụng tiếp theo.

- Kiểm tra sự xuất hiện của cột sắc ký: Cột sắc ký lỏng mới thường đi kèm với báo cáo kiểm tra xuất xưởng và giấy chứng nhận hợp lệ. Kiểm tra xem thân cột sắc phổ có bị hư hỏng, nứt hay không, đặc biệt là bộ phận nối liền hai đầu cột, nếu phát hiện vấn đề thì phải kịp thời thay thế. Đồng thời, các thông tin như mô hình, số sê-ri của cột sắc ký được ghi lại cho các truy vấn tiếp theo và sử dụng bảo trì.

Bước cài đặt

1. Giai đoạn dòng chảy còn lại của hệ thống xả: xả dòng chảy ban đầu bên trong thiết bị thông qua van quá nhiều và các cách khác để tránh trộn lẫn với dung môi bảo quản trong cột sắc ký mới để tạo ra lượng mưa hoặc chất gây nhiễu. Máy bơm có thể được khởi động để chạy với tốc độ dòng chảy thấp hơn trong một thời gian để thực hiện điều này.

Kết nối cột sắc ký: Xác định hướng xuất khẩu pha của cột sắc ký tốt (các nhà sản xuất thông thường sẽ có đánh dấu rõ ràng trên cột sắc ký). Cẩn thận gắn một đầu của cột sắc ký vào đường ống phía sau bộ lấy mẫu và đầu kia vào đường ống phía trước máy dò. Khi kết nối để đảm bảo giao diện phù hợp chặt chẽ, phương pháp thường được sử dụng là thắt chặt đai ốc tiếp quản bằng tay trước, sau đó gia cố thích hợp bằng cờ lê, nhưng chú ý đến độ mạnh vừa phải để tránh làm hỏng khớp cột sắc ký.

3. Rửa sạch ban đầu: Sau khi cài đặt hoàn tất, chọn cột sắc ký tương đối phù hợp với dòng chảy ban đầu để rửa sạch. Đối với cột sắc ký ngược, dung dịch hỗn hợp dung môi hữu cơ nước tỷ lệ cao thường được chọn làm pha chảy ban đầu. Thiết lập tốc độ dòng chảy thấp hơn và cho phép pha chảy chậm qua cột sắc ký, với mục đích thay thế dung môi bảo quản còn lại bên trong cột, đồng thời làm ướt bề mặt đóng gói pha cố định và loại bỏ bong bóng khí).

4. Cột sắc ký cân bằng: Hoạt động cân bằng trước khi chuyển sang pha dòng chảy mục tiêu để phân tích sau khi rửa ban đầu. Cho phép cột sắc ký đạt trạng thái ổn định trong điều kiện pha dòng chảy mục tiêu, quan sát sự thay đổi áp suất và tình huống cơ bản. Khi áp suất ổn định và đường cơ sở bằng phẳng, nó cho thấy cột sắc ký về cơ bản đã cân bằng tốt và sẵn sàng để phân tích mẫu.

Lưu ý

- Tránh giới thiệu bong bóng: Trong suốt quá trình lắp đặt, đặc biệt chú ý đến việc ngăn không khí xâm nhập vào cột sắc ký. Bởi vì bong bóng sẽ chiếm không gian bên trong cột, ảnh hưởng đến hiệu ứng tách chất tan, và cũng có thể dẫn đến áp suất cao cục bộ làm hỏng cột sắc ký. Cho nên trong quá trình kết nối đường ống và rửa sạch, cần luôn luôn chú ý xem có bong bóng khí sinh ra hay không, nếu có thì phải kịp thời loại trừ.

- Kiểm soát tốc độ dòng chảy và áp suất: Khi rửa và cân bằng lần đầu tiên, không nên sử dụng tốc độ dòng chảy quá cao để tránh nới lỏng hoặc dịch chuyển lớp cột sắc ký do tác động áp suất cao đột ngột. Khi các cột sắc ký dần dần thích nghi với môi trường pha chảy, sau đó điều chỉnh tốc độ dòng chảy đến phạm vi phù hợp theo tình hình thực tế.

Thông qua các bước cài đặt và cân nhắc của các thông số kỹ thuật trên, có thể đảm bảo lắp đặt và sử dụng cột sắc ký lỏng chính xác, tạo cơ sở cho kết quả phân tích chính xác và đáng tin cậy.