Các tế bào giải phóng các loại túi có nguồn gốc màng khác nhau trong môi trường ngoại bào. Những túi có nguồn gốc từ màng này được gọi là túi ngoại bào (EV) và bao gồm exosome và microbame. Exosome là các túi ngoại bào tương đối nhỏ (30-150nm) có thể chuyển các đại phân tử sinh học như axit nucleic, protein, enzyme và lipid giữa các tế bào và là một mô hình quan trọng trong giao tiếp giữa các tế bào. Ngoài ra, chúng có thể được sử dụng như một dấu ấn sinh học cho các bệnh khác nhau hoặc như một hệ thống vận chuyển thuốc tự nhiên cho các tác nhân trị liệu thế hệ tiếp theo.

Trong bài viết này, chúng tôi mô tả một cách nhanh chóng và đơn giản để cô lập exosome từ các tế bào gốc có nguồn gốc chất béo bằng cách kết hợp các máy ly tâm tốc độ cao và quá tốc. Tế bào trong BioBLU ® Được nuôi cấy trong bể phản ứng sinh học dùng một lần 0,3c và được DASbox ® Điều khiển hệ thống lò phản ứng sinh học mini. Hệ thống lò phản ứng sinh học mini DASbox có thể nuôi cấy một số lượng lớn các tế bào gốc để có được exosome năng suất cao. Sau đó, chúng tôi đã loại bỏ môi trường có điều kiện bằng cách sử dụng máy ly tâm CR22N. Đây là một máy ly tâm tốc độ cao với RCF lên tới 32.300 x g. Trong bài viết này, chúng tôi đã sử dụng vòng quay góc cố định R15A có thể chứa cả ống đáy nón 10 x 50 mL và 10 x 15 mL. Để cô đặc thêm exosome, chúng tôi đã sử dụng máy ly tâm CP100NX với RCF tối đa 803.000 x g và rôto ngang P32ST có khả năng chứa ống ly tâm 6 x 40 mL. Ngoài ra, một exosome đồng nhất tinh khiết có thể được phân lập nhanh chóng bằng cách sử dụng sucrose pad trong các bước ly tâm quá tốc, so với nhóm đối chứng không sử dụng sucrose pad. Trong suốt quá trình ly tâm, chúng tôi sử dụng rôto khối lượng lớn, do đó giảm các bước ly tâm lặp đi lặp lại và giảm thời gian tách exosome xuống còn 4 giờ, nhanh hơn các phương pháp tách khác như kết tủa hoặc lọc.