I. Giới thiệu

Máy lắc nhiệt độ không đổi nuôi cấy phấn hoa là một thiết bị quan trọng trong công nghệ sinh học thực vật. Nó tạo ra một môi trường nuôi cấy chất lỏng ổn định, đồng nhất cho phấn hoa ly thể bằng cách kiểm soát chính xác nhiệt độ, tốc độ quay và ánh sáng, mô phỏng và tối ưu hóa các điều kiện sinh lý của nó, do đó gây ra nó để thay đổi con đường phát triển giao tử bình thường, chuyển sang phát triển bào tử và cuối cùng tạo ra cây đơn bội hoặc mô sẹo.

Hai, cấu hình thường dùng:

• nhiệt độ：25°máy bay C-28°C(vùng lõi), độ chính xác kiểm soát nhiệt độ cần đạt ±0.5°Choặc cao hơn để đáp ứng tiền xử lý kích thích nhiệt (chẳng hạn như33°C) Các chương trình phức tạp.

• Tốc độ quay:50 - 120 vòng / phút(khu vực tốc độ thấp), vận hành cần cực kỳ ổn định, đảm bảo giữ ấm và trộn đều mà không làm tổn thương tế bào phấn hoa yếu ớt.

• Cường độ ánh sáng:Thông thường trong điều kiện tối (với một tấm chắn ánh sáng tiêu chuẩn hoặc đặt trong phòng tối), một số nghiên cứu về nhu cầu ánh sáng/Chu kỳ tối, cần cấu hình hệ thống ánh sáng điều khiển.

III. Chi tiết chương trình

Cảnh điển hình:

Chương trình được sử dụng rộng rãi trong nhân giống di truyền và nghiên cứu sinh lý của các loại cây công nghiệp quan trọng như thuốc lá, lúa gạo, ớt, cải dầu và lúa mì. Mục đích chính của nó là thông qua các bào tử nhỏ tự do/mạc đường ruột muqueuses digestives (Gấp đôi Haploid, DH) Cây, từ đó rút ngắn đáng kể thời gian gây giống, đẩy nhanh việc chọn giống thuần hệ và nghiên cứu chức năng gen.

Thông số cấu hình và nguyên tắc:

Sự thành công của việc trồng phấn hoa phụ thuộc rất nhiều vào sự chính xác và ổn định của môi trường vật lý và hóa học được cung cấp bởi máy lắc nhiệt độ không đổi. Nguyên tắc cốt lõi của nó là cùng nhau hướng dẫn phấn hoa từ con đường phát triển giao tử sang con đường tạo phôi thông qua kiểm soát nhiệt độ chính xác, dao động nhẹ nhàng và ánh sáng có thể kiểm soát.

• Nhiệt độ:25°máy bay C-28°C(Khu trung tâm)

Nhiệt độ là một trong những thông số quan trọng nhất, sự phân hóa phấn hoa và khởi động phôi cực kỳ nhạy cảm với biến động nhiệt độ, vì vậy thiết bị phải có khả năng hoạt động trong25°CĐến28°CTrong phạm vi lõi duy trì ổn định lâu dài, phạm vi dao động thường yêu cầu nhỏ hơn ±0.5°C. Ngoài ra, kích thích nhiệt thường được sử dụng trong nuôi cấy ớt (như33°CXử lý hàng giờ) tiền xử lý cưỡng bức, chẳng hạn như, cũng đặt ra yêu cầu về tốc độ tăng nhiệt của thiết bị và độ chính xác của việc chuyển đổi nhiệt độ.

• Tốc độ quay:50 - 120 vòng / phút(Vùng tốc độ thấp)

Kiểm soát tốc độ quay liên quan trực tiếp đến tỷ lệ sống sót của tế bào. Vì phấn hoa là các tế bào mỏng manh thiếu sự bảo vệ của thành tế bào, tốc độ quay quá cao tạo ra lực cắt phá hủy. Do đó, máy rung phải có khả năng50-120 vòng / phútHoạt động trơn tru và đồng đều trong phạm vi tốc độ thấp, dao động nhẹ nhàng này có thể đảm bảo chất dinh dưỡng và trao đổi khí đồng đều trong dung dịch nuôi cấy, nhưng cũng có hiệu quả ngăn chặn sự tích tụ của các cụm tế bào, đồng thời tránh phá vỡ tế bào do rung lắc dữ dội.

• Cường độ ánh sáng: thường là điều kiện tối

Quản lý ánh sáng thường chọn điều kiện tối trong giai đoạn đầu nuôi cấy, vì bóng tối đã được chứng minh là có lợi hơn cho việc khởi động phôi của bào tử nhỏ. Do đó, nó là một thực tế phổ biến để chọn một máy lắc với một thiết kế đầy đủ bóng râm hoặc đặt nó trong một căn phòng tối. Và đối với một số nghiên cứu đòi hỏi phải nghiên cứu ảnh hưởng của chu kỳ ánh sáng đối với sự phát triển của phôi, máy lắc cần được trang bị một hệ thống ánh sáng có thể lập trình để kiểm soát chu kỳ ánh sáng và bóng tối chính xác.

Cuối cùng, môi trường vô trùng là sự đảm bảo cho sự thành công của thí nghiệm. Buồng lắc được sử dụng phổ biến304hoặc316Vật liệu thép không gỉ, do khả năng chống ăn mòn, bề mặt nhẵn và dễ làm sạch và khử trùng, có thể ngăn ngừa ô nhiễm vi sinh vật một cách hiệu quả và đảm bảo phấn hoa phát triển trong môi trường tinh khiết.

IV. Xuất xứ văn học

• Touraev, A., Vicente, O., & Heberle-Bors, E. (1997). Khởi đầu sinh phôi vi bào do căng thẳng. Xu hướng trong khoa học thực vật, 2(8), 297-302.

  Đây là một đánh giá về nền tảng, giải thích một cách có hệ thống nhiều loại thực vật, bao gồm cả thuốc lá, rằng sự phát triển phôi bào tử nhỏ của chúng được gây ra bởi căng thẳng nghịch cảnh, chẳng hạn như căng thẳng nhiệt độ, và thảo luận chi tiết về các phương pháp nuôi cấy huyền phù lỏng có liên quan, làm rõ vị trí trung tâm của máy lắc nhiệt độ không đổi trong hệ thống kỹ thuật này.

• Gui, Y., et al. (2018). Cải thiện hiệu quả văn hóa anther của gạo bằng căng thẳng không sinh học. Tế bào thực vật, mô và văn hóa cơ quan (PCTOC), 135(2), 269-279.

  Tài liệu nghiên cứu này cung cấp các trường hợp thực hành mới nhất về trồng phấn hoa lúa. Để tối ưu hóa hiệu quả nuôi cấy, hệ thống nuôi cấy chất lỏng đã được sử dụng rõ ràng và trong phần Vật liệu và Phương pháp mô tả cụ thể các thông số nuôi cấy được thực hiện trên máy lắc nhiệt độ không đổi (ví dụ: tốc độ quay, nhiệt độ), phản ánh ứng dụng thực tế của thiết bị trong công nghệ nhân giống cây trồng hiện đại.

• Kim, M., et al. (2013). Sản xuất haploid gấp đôi thông qua văn hóa anther trong Capsicum annuum L. Tạp chí Khoa học & Công nghệ Vườn Hàn Quốc, 31(3), 350-357.

  Tài liệu này đại diện cho một ví dụ điển hình về việc áp dụng các kỹ thuật nuôi cấy phấn hoa trong các loại cây trồng có độ khó cao hơn, chẳng hạn như ớt. Phần phương pháp học của bài báo nêu rõ: "Dùng thuốc hoa trong môi trường chất lỏng trên giường lắc xoay.80 vòng / phútTốc độ quay, ở......25°CNuôi cấy trong điều kiện tối "cung cấp các thông số sử dụng thiết bị cụ thể và hỗ trợ giao thức cho việc nhân giống haploid của các loại cây trồng làm vườn như ớt.