Phương pháp cốt lõi của nuôi cấy tế bào vi trọng lực để tránh tái hợp tế bào

Tối ưu hóa mật độ tiêm chủng: Kiểm soát nồng độ tế bào ban đầu trong 1 × 10 ⁴~5 × 10 ⁵ cells/mL (điều chỉnh theo loại tế bào), tránh nồng độ quá cao dẫn đến kết tụ tự nhiên.

2. Chọn môi trường phù hợp: Thêm một lượng thuốc chống kết tụ vừa phải (ví dụ: 0,1%~0,5% methylcellulose, pralandolysaccharide) hoặc sử dụng môi trường huyết thanh thấp/không huyết thanh để giảm kết dính qua trung gian protein.

3. Tăng cường cân bằng động của hệ thống nuôi cấy: sử dụng chức năng kiểm soát tốc độ chính xác của Bắc Kinh Kexingjingye TDCCS-3D, duy trì vòng quay nhẹ 5~20 vòng/phút, phân tán tế bào bằng lực cắt chất lỏng; Thường xuyên thay thế 1/3 môi trường để loại bỏ chất thải trao đổi chất và các yếu tố gây cảm ứng tích tụ.

4. Các tế bào tiền xử lý với các thùng chứa: tiêu hóa các khối tế bào nhẹ nhàng với enzyme tụy trước khi tiêm, đảm bảo trạng thái đình chỉ tế bào đơn; Các bức tường bên trong của chai được nuôi cấy để xử lý ưa nước hoặc lớp phủ (chẳng hạn như polylysine), làm giảm xác suất tái hợp thành tế bào.

5. Điều chỉnh chính xác môi trường nuôi cấy: duy trì pH 7,2~7,4, nhiệt độ 37 ℃ ± 0,5 ℃, tránh biến động môi trường gây ra sự tích tụ căng thẳng tế bào; Một số tế bào có thể thêm EDTA (0,02%) để hỗ trợ phân tán.