PT đầy đủ bước sóng Enzyme MarkingNó là một công cụ phân tích có độ chính xác cao tích hợp nhiều chế độ phát hiện như hấp thụ ánh sáng cực tím-nhìn thấy, huỳnh quang, phát quang hóa học, v.v., được sử dụng rộng rãi trong khoa học đời sống, chẩn đoán lâm sàng, nghiên cứu và phát triển thuốc và an toàn thực phẩm. Lợi thế cốt lõi của nó là vùng phủ sóng rộng (thường 190-1000nm) và khả năng phát hiện đa chức năng, đáp ứng nhu cầu đa dạng từ nghiên cứu khoa học cơ bản đến sản xuất công nghiệp. Nó dựa trên định luật hấp thụ ánh sáng (định luật Bill-Lambert), trong đó ánh sáng bước sóng cụ thể được phát ra thông qua một nguồn sáng và sau khi được hấp thụ bởi mẫu, máy dò đo cường độ ánh sáng còn lại, tính toán độ hấp thụ (A) để xác định nồng độ phân tử mục tiêu.

　　PT đầy đủ bước sóng Enzyme MarkingHoạt động cần kết hợp các yêu cầu thử nghiệm (ví dụ: chế độ phát hiện, loại mẫu) để thiết lập tham số và kiểm soát quy trình, các bước cốt lõi bao gồm "Chuẩn bị - Thiết lập - Phát hiện - Xử lý dữ liệu", sau đây là quy trình hoạt động chung:

I. Chuẩn bị trước khi hoạt động

Chuẩn bị mẫu và thuốc thử

Đảm bảo rằng các mẫu được kiểm tra (chẳng hạn như bảng ELISA, dung dịch axit nucleic, đình chỉ tế bào, v.v.) đã được xử lý theo sơ đồ thử nghiệm và không có bong bóng khí, tường treo nhỏ giọt (nếu có bong bóng, có thể được loại bỏ bằng cách gõ nhẹ vào tường tấm; các giọt treo tường cần được hút khô bằng khăn giấy).

Chuẩn bị đối chiếu trống, hàng tiêu chuẩn, hàng QC, sắp xếp theo bố cục đặt trước trong tấm micropore (đề nghị ghi lại bố cục vị trí lỗ để tránh nhầm lẫn).

Kiểm tra thiết bị và môi trường

Xác nhận rằng đường dây điện của máy đo enzyme được kết nối bình thường, kiểm tra xem phòng mẫu có sạch không (không có bụi, dư lượng chất lỏng) trước khi bật nguồn và lau bằng vải không bụi nếu cần thiết.

Nếu thí nghiệm cần kiểm soát nhiệt độ (ví dụ: ủ 37 ° C) hoặc chấn động, hãy xác nhận trước rằng các chức năng liên quan của thiết bị là bình thường (ví dụ: mô-đun điều khiển nhiệt độ có thể đạt đến nhiệt độ cài đặt hay không).

Bật nguồn máy tính và máy đánh dấu enzyme, khởi động phần mềm vận hành hỗ trợ và chờ thiết bị tự kiểm tra hoàn tất (thường hiển thị trạng thái "sẵn sàng").

II. Thiết lập phương pháp phát hiện

Chọn chế độ phát hiện

Chọn chế độ phát hiện tương ứng trong phần mềm theo loại thử nghiệm:

Phát hiện ánh sáng hấp thụ (ví dụ: ELISA, Định lượng axit nucleic): Cần thiết lập bước sóng phát hiện (ví dụ: bước sóng chính 450nm, bước sóng tham số 630nm), băng thông (mặc định 1-5nm).

Phát hiện huỳnh quang: cần thiết lập bước sóng kích thích (ví dụ 485nm), bước sóng phát xạ (ví dụ 535nm) và chọn đọc trên/dưới (mẫu chất lỏng thường chọn đỉnh, nuôi cấy tế bào chọn đáy).

Phát hiện phát quang hóa học: Không cần thiết lập bước sóng, trực tiếp chọn chế độ "phát quang hóa học", chú ý tắt nguồn sáng phòng mẫu để giảm nhiễu.

Phát hiện động lực: Cần thiết lập thêm khoảng thời gian phát hiện (ví dụ: đọc mỗi 10 giây), tổng thời gian phát hiện (ví dụ: 30 phút) và bật điều khiển nhiệt độ (nếu cần phản ứng nhiệt độ không đổi).

Đặt tham số tấm micropore

Chọn thông số kỹ thuật tấm micropore (ví dụ: tấm 96 lỗ, tấm 384 lỗ) và xác định phạm vi phát hiện (chẳng hạn như "phát hiện toàn bộ tấm" hoặc chỉ định một vị trí lỗ cụ thể, chẳng hạn như A1-H12).

Để loại trừ hiệu ứng cạnh hoặc một phần của lỗ, lỗ "không phát hiện" có thể được đánh dấu trong phần mềm.

Thiết lập truy cập

Kiểm soát nhiệt độ: Nếu phản ứng cần nhiệt độ không đổi (chẳng hạn như phản ứng enzyme ở 37 ℃), hãy đặt nhiệt độ mục tiêu (lỗi thường ± 0,1 ℃) và chờ thiết bị làm nóng trước đến nhiệt độ đặt.

Sốc: Khi trộn mẫu trước khi phát hiện, hãy đặt chế độ sốc (ví dụ: sốc tuyến tính), tốc độ quay (ví dụ: 500 vòng/phút) và thời gian (ví dụ: 10 giây).

Tham chiếu đến hiệu chỉnh bước sóng cụ thể (phát hiện ánh sáng hấp thụ): Bật "phát hiện bước sóng kép" để cải thiện độ chính xác của dữ liệu bằng cách tham chiếu bước sóng cụ thể (ví dụ: 630nm) để khấu trừ nhiễu nền (ví dụ: vết trầy xước tấm vi mô, bong bóng).

III. Kiểm tra mẫu

Tải tấm micropore

Nhẹ nhàng đặt tấm micropore vào khay trong phòng mẫu, đảm bảo rằng các cạnh của tấm được căn chỉnh với khe định vị pallet (tránh sự dịch chuyển vị trí dẫn đến đọc sai), đóng cửa phòng mẫu.

Bắt đầu phát hiện

Nhấn "Bắt đầu phát hiện" trong phần mềm, thiết bị sẽ tự động chạy theo phương pháp đặt trước và màn hình hiển thị tiến trình phát hiện trong thời gian thực (chẳng hạn như vị trí lỗ đã hoàn thành, số đọc hiện tại).

Tránh chạm vào thiết bị hoặc mở cửa phòng mẫu trong quá trình phát hiện để ngăn chặn sự ổn định của đường dẫn ánh sáng.

IV. Xử lý và xuất dữ liệu

Xem kết quả trực tiếp

Sau khi phát hiện hoàn tất, phần mềm tự động tạo ra dữ liệu thô (chẳng hạn như giá trị hấp thụ, cường độ huỳnh quang) và trình bày dưới dạng bảng hoặc biểu đồ nhiệt.

Có thể xem dữ liệu lỗ đơn, giá trị trung bình (chẳng hạn như giá trị trung bình của lỗ lặp lại sản phẩm tiêu chuẩn) hoặc tạo đường cong tiêu chuẩn (nếu nồng độ sản phẩm tiêu chuẩn được đặt).

Phân tích dữ liệu

Xử lý dữ liệu theo yêu cầu thử nghiệm:

Phân tích định lượng (ví dụ: ELISA): Bằng cách phù hợp với đường cong tiêu chuẩn (tuyến tính, phù hợp với bốn tham số, v.v.) bằng nồng độ sản phẩm tiêu chuẩn và giá trị tín hiệu tương ứng, phần mềm tự động tính toán nồng độ mẫu không xác định.

Tính toán tỷ lệ (ví dụ: độ tinh khiết axit nucleic): Các tỷ lệ 260/280nm, 260/230nm được tính toán tự động trong phát hiện hấp thụ ánh sáng để đánh giá độ tinh khiết của mẫu.

Đường cong động học: tạo ra đường cong "giá trị tín hiệu-thời gian", có thể tính toán các thông số như tốc độ phản ứng, chu kỳ bán rã, v.v.

Xuất và lưu dữ liệu

Lưu dữ liệu ở định dạng mặc định của phần mềm (chẳng hạn như.csv,.txt) hoặc xuất sang Excel, định dạng PDF để viết báo cáo.

Chúng tôi khuyên bạn nên lưu mẫu phương pháp phát hiện cùng một lúc (có thể được gọi trực tiếp vào lần tiếp theo thử nghiệm tương tự mà không cần thiết lập lại).

V. Hoàn thiện sau khi hoạt động

Tắt công cụ

Sau khi kiểm tra xong, lấy tấm vi lỗ ra, dọn dẹp phòng mẫu (nếu có rò rỉ chất lỏng cần lau chùi kịp thời).

Lần lượt tắt phần mềm tiêu chuẩn enzyme, nguồn điện cụ và nguồn điện máy tính.

Hồ sơ&Làm sạch

Ghi lại thông tin thí nghiệm (chẳng hạn như ngày phát hiện, mẫu thiết bị, thông số phương pháp) để truy xuất dữ liệu dễ dàng.

Phòng mẫu và khay được làm sạch thường xuyên (được lau bằng cồn 75% để tránh dư lượng thuốc thử ăn mòn) và cần được che phủ khi không sử dụng trong thời gian dài.