Sản phẩm tiêu chuẩnLà chất tham chiếu cốt lõi để phân tích định lượng trong phòng thí nghiệm, xác minh phương pháp, tính chuẩn mực của công thức và pha loãng trực tiếp xác định độ chính xác của kết quả kiểm tra. Bài viết này sắp xếp lại một bộ các thao tác đơn giản dễ hiểu, có thể trực tiếp hạ cánh, giúp nhân viên thí nghiệm tránh được sai số thông thường, đảm bảo dữ liệu thí nghiệm đáng tin cậy.

I. Chuẩn bị trước khi chế biến

Tiền xử lý hàng tiêu chuẩn

Cân bằng đến nhiệt độ phòng: Các sản phẩm tiêu chuẩn được lấy ra từ môi trường lạnh/đông lạnh, cần được đặt ở nhiệt độ phòng trong 30~60 phút, để chúng phù hợp với nhiệt độ môi trường phòng thí nghiệm, tránh sự hấp thụ độ ẩm hoặc lỗi khối lượng khi cân do chênh lệch nhiệt độ.

Mở và đóng gói: Các sản phẩm tiêu chuẩn mở đầu tiên cần được đóng gói với số lượng sử dụng tối thiểu để tránh đông lạnh nhiều lần (đặc biệt là các sản phẩm tiêu chuẩn sinh học); Sử dụng ống ly tâm dùng một lần vô trùng và không có enzyme khi phân phối, làm tốt việc đánh dấu nhãn (tên, nồng độ, ngày phân phối, ngày hết hạn).

Xác nhận độ tinh khiết: kiểm tra giấy chứng nhận sản phẩm tiêu chuẩn trước khi sử dụng, xác nhận độ tinh khiết, độ ẩm, hàm lượng tạp chất và các chỉ số khác, nếu sản phẩm tiêu chuẩn chứa nước tinh thể, cần tính tỷ lệ nước tinh thể khi tính toán nồng độ pha chế, tránh độ lệch nồng độ.

Chuẩn bị và hiệu chuẩn thiết bị

Lựa chọn dụng cụ đo lường: theo khối lượng pha chế để chọn thiết bị có độ chính xác phù hợp, chẳng hạn như pipet gun/pipet cho dung dịch dưới 10 mL (độ chính xác loại A), chai dung tích trên 100 mL; Nghiêm cấm phối chế chính xác bằng ống đo phổ thông.

Làm sạch thiết bị: tất cả các thiết bị tiếp xúc với các sản phẩm tiêu chuẩn cần phải được làm sạch bằng nước siêu tinh khiết hơn 3 lần, các sản phẩm tiêu chuẩn hữu cơ cũng cần được làm sạch bằng dung môi hữu cơ tương ứng để tránh các tạp chất còn lại gây ô nhiễm các sản phẩm tiêu chuẩn.

Xác minh hiệu chuẩn: Định kỳ hiệu chuẩn súng pipet, chai dung lượng và các thiết bị khác để đảm bảo lỗi của chúng nằm trong phạm vi cho phép và hồ sơ hiệu chuẩn cần được lưu trữ để kiểm tra.

Lựa chọn và xử lý dung môi

Phù hợp với đặc tính sản phẩm tiêu chuẩn: sản phẩm tiêu chuẩn hòa tan trong nước được ưu tiên sử dụng nước siêu tinh khiết (điện trở suất ≥18,2M Ω・cm); Các sản phẩm tiêu chuẩn hòa tan trong chất béo cần phải chọn các dung môi hữu cơ tương ứng (ví dụ: methanol, acetonitrile, n-hexane) và dung môi cần có sắc ký tinh khiết hoặc phân tích tinh khiết trở lên.

Tiền xử lý dung môi: dung môi dễ bay hơi cần được vận hành trong tủ thông gió để tránh sự bay hơi của dung môi ảnh hưởng đến nồng độ; Dung môi chứa hệ thống đệm cần điều chỉnh độ pH đến phạm vi yêu cầu trước, và được trang bị hiện tại để ngăn chặn khả năng đệm thất bại.

II. Lưu ý hoạt động của cân và dung lượng cố định

Liên kết cân

Lựa chọn cân bằng: Chọn cân chính xác tương ứng theo phạm vi cân của sản phẩm tiêu chuẩn, chẳng hạn như cân tiêu chuẩn cấp miligam với một phần trăm nghìn để phân tích cân, cân tiêu chuẩn cấp gram có thể được sử dụng với một phần mười nghìn cân.

Chống ẩm và chống bay hơi: các sản phẩm tiêu chuẩn dễ hút ẩm cần được cân nhanh trong máy sấy; Chất lỏng tiêu chuẩn dễ bay hơi cần dùng màng niêm phong để niêm phong bình cân, giảm tổn thất bay hơi.

Cân song song: đề nghị 2 cân song song, nếu độ lệch kết quả của hai lần vượt quá 0,5%, cần cân lại để đảm bảo dữ liệu cân chính xác.

Liên kết định dung

Hòa tan hoàn toàn: Sau khi chuyển các sản phẩm tiêu chuẩn có trọng lượng tốt sang chai dung tích, thêm một lượng nhỏ dung môi để lắc hoặc siêu âm đầy đủ, đảm bảo rằng các sản phẩm tiêu chuẩn được hòa tan hoàn toàn và không có hạt có thể nhìn thấy bằng mắt thường; Các sản phẩm tiêu chuẩn sinh học (như protein, axit nucleic) cần pha trộn nhẹ nhàng, tránh chấn động mạnh dẫn đến mất hiệu lực hoạt động.

Dung tích chính xác: sau khi nhiệt độ dung dịch phù hợp với nhiệt độ phòng, dung môi được thêm từ từ vào vạch quy mô chai dung tích, và khi tiếp cận quy mô được thêm vào từng giọt bằng ống nhỏ giọt keo, để đảm bảo bề mặt lõm bằng phẳng với vạch quy mô; Sau khi ổn định dung lượng, đảo ngược bình dung lượng 10 - 15 lần, để dung dịch trộn đều.

III. Cân nhắc cốt lõi của quá trình pha loãng

Chọn độ dốc pha loãng

Chất lỏng dự trữ tiêu chuẩn nồng độ cao cần được pha loãng theo từng giai đoạn để tránh sai số nồng độ do pha loãng trực tiếp, chẳng hạn như pha loãng 1000 μg/mL dung dịch dự trữ đầu tiên đến 100 μg/mL dung dịch trung gian và sau đó đến 10 μg/mL dung dịch làm việc.

Pha loãng bội số không nên quá lớn, pha loãng một lần bội số đề nghị không vượt quá 100 lần, nếu cần nồng độ rất thấp của chất lỏng tiêu chuẩn, có thể pha loãng nhiều lần bội số nhỏ.

Pha loãng chi tiết hoạt động

Khi di chuyển chất lỏng dự trữ, đầu súng di chuyển cần được rửa sạch 2~3 lần để giảm tổn thất treo tường; Sau khi chuyển, cần dùng dung môi rửa sạch vách trong pipet, đảm bảo chuyển toàn bộ vào thùng chứa pha loãng.

Trong quá trình pha loãng cần vừa thêm dung môi vừa trộn đều nhẹ nhàng, đặc biệt là dung dịch tiêu chuẩn sền sệt hoặc dễ phân tầng, tránh nồng độ cục bộ không đều.

Kiểm tra ổn định sau pha loãng

Một số sản phẩm tiêu chuẩn (chẳng hạn như vitamin, thuốc trừ sâu dư lượng tiêu chuẩn) có độ ổn định kém của chất lỏng làm việc và cần được sử dụng hiện tại; Để bảo quản ngắn hạn, cần lưu trữ trong các điều kiện quy định của giấy chứng nhận và kiểm tra sự xuất hiện của nó trước khi sử dụng (không đục, lắng đọng, đổi màu).

IV. Lưu trữ và lưu ý hồ sơ sau khi xây dựng

Điều kiện bảo quản

Lưu trữ theo yêu cầu của giấy chứng nhận sản phẩm tiêu chuẩn, chẳng hạn như sản phẩm tiêu chuẩn sinh học cần bảo quản đông lạnh - 20 ℃, sản phẩm tiêu chuẩn hữu cơ có thể được bảo quản lạnh tránh ánh sáng; Thùng chứa cần được niêm phong để tránh tiếp xúc với các vật liệu như phích cắm cao su dẫn đến hấp phụ.

Chất lỏng làm việc được đề nghị chia thành một lượng sử dụng duy nhất, tránh tan băng lặp đi lặp lại hoặc mở ra dẫn đến ô nhiễm và thay đổi nồng độ.

Lưu giữ hồ sơ

Làm tốt hồ sơ công thức, nội dung bao gồm tên sản phẩm tiêu chuẩn, số lô, số giấy chứng nhận, khối lượng/khối lượng, loại dung môi, nồng độ công thức, gradient pha loãng, ngày công thức, người vận hành, v.v., để đảm bảo dữ liệu có thể truy xuất nguồn gốc.