Trong nghiên cứu khoa học thần kinh, các mô hình động vật ổn định, đáng tin cậy là nền tảng để khám phá các cơ chế sống và xác nhận các chiến lược điều trị. Phẫu thuật mở sọ chuột là công nghệ cốt lõi để xây dựng nhiều mô hình nghiên cứu khoa học não, tính quy phạm và chính xác của hoạt động này là rất quan trọng. Một ca phẫu thuật thành công không chỉ có thể giảm thiểu tối đa tổn thương cho động vật mà còn là chìa khóa để đảm bảo tính chính xác và khả năng lặp lại của dữ liệu thí nghiệm tiếp theo.

Thuần thục nắm giữ phẫu thuật mở sọ, không thể thiếu sự hiểu biết sâu sắc về kết cấu giải phẫu não bộ và rèn luyện nhiều lần kỹ thuật thao tác tinh tế. Trong thực tế, nhiều nhà nghiên cứu thường phải đối mặt với những vấn đề điển hình sau:

✅ Làm thế nào để an toàn mài xương sọ, đảm bảo mô não hoàn chỉnh không bị tổn thương?

✅ Làm thế nào để cân bằng cường độ cố định với tính toàn vẹn của tầm nhìn hình ảnh khi cố định cửa sổ sọ?

✅ Thao tác vô trùng trong phẫu thuật và chăm sóc động vật sau phẫu thuật, có những chi tiết nào cần phải coi trọng?

Bài viết này sẽ xoay quanh quy trình phẫu thuật mở sọ chuột cổ điển, thông qua trình diễn các bước rõ ràng và phân tích các điểm chính, hệ thống sắp xếp các phương pháp cốt lõi của kỹ thuật này. Là bài viết đầu tiên trong "Phẫu thuật chuẩn bị chuột hình ảnh huỳnh quang kép", bài viết này nhằm giúp người đọc củng cố nền tảng của phẫu thuật. Trong tương lai, chúng tôi cũng sẽ lần lượt giải thích chi tiết các thao tác phẫu thuật tinh tế hơn như cấy ghép GRIN Lens, mở cửa sổ tủy sống, kết hợp hai photon và điện cực EEG, đồng hành cùng bạn trên con đường nghiên cứu khoa học không ngừng cải tiến công nghệ.

　　Gợi ý ấm áp:Cân nhắc đến cảm nhận xem của bạn, chúng tôi đã tiến hành xử lý nhu hòa một số hình ảnh phẫu thuật, xin yên tâm xem.

　　

　　Phần 01Chuẩn bị trước phẫu thuật

1. Dụng cụ phẫu thuật: hai nhíp tinh tế, một cái xẻng cạo mini hai đầu, một cái cắt lò xo.

2. Vật tư thí nghiệm: Chuẩn bị vật tư cần thiết cho thí nghiệm và nước muối sinh lý (1% ceftriaxone natri).

3. Dụng cụ khử trùng: Tất cả các dụng cụ được sử dụng trong phẫu thuật hoặc cấy ghép cần được khử trùng trước khi sử dụng, có thể được khử trùng bằng ethanol 75%, có điều kiện có thể được khử trùng bằng nồi hấp định kỳ.

4. Khử trùng bàn mổ: Trước khi sử dụng bàn mổ nên lau sạch 75% ethanol để khử trùng, bàn mổ nên được lót bằng vải vô trùng, miếng hấp thụ sạch hoặc khăn, sau mỗi lần phẫu thuật phải thay thế các vật liệu này.

　　Phần 02Gây mê, cố định

1. Chuột được đưa vào buồng chứa thuốc gây mê để gây mê, lưu lượng khí và quy mô gây mê được thiết lập theo máy lanh khí của phòng thí nghiệm. Khi chuột có dấu hiệu thở chậm và chân tay thả lỏng, điều đó cho thấy chuột đã được gây mê.

2. Cố định chuột sau khi gây mê trên máy định vị lập thể não và duy trì gây mê, luôn chú ý quan sát hơi thở của chuột trong quá trình phẫu thuật.

　　Phần 03Tẩy lông

1. Áp dụng đều thuốc mỡ mắt erythromycin cho mắt chuột, liều lượng nên được bao phủ hoàn toàn để mắt không bị lộ ra ngoài.

2. Sử dụng tăm bông y tế để nhúng kem tẩy lông, áp dụng đều cho rễ tóc theo hướng mọc tóc, sau khoảng 2 phút sử dụng tăm bông để lau sạch tóc trên đầu.

3. Dùng tăm bông y tế nhúng nước muối sinh lý, rửa sạch kem tẩy lông còn sót lại trên đầu chuột.

4. Sử dụng iốt volt để lau sạch da đã rụng lông.

Phần 04Phơi bày và làm sạch hộp sọ

1. Sử dụng cắt lò xo để cắt da đầu.

2. Lột bỏ toàn bộ niêm mạc trên xương sọ và mỡ dư thừa ở hai chỗ kết nối cơ bắp.

3. Sử dụng xẻng cạo hai đầu mini để cạo màng nhầy, mô liên kết còn sót lại trên bề mặt hộp sọ.

4. Giữ quả bóng rửa tai, thổi bề mặt hộp sọ cho đến khi khô hoàn toàn.

　　Phần 05Mở hộp sọ

1. Sử dụng lỗ tiêm virus hoặc vị trí định vị làm tâm tròn, giữ nhíp tinh tế để đặt các slide tròn có thông số kỹ thuật thích hợp trên bề mặt hộp sọ.

2. Điều chỉnh tốc độ khoan sọ xuống mức thấp, sau khi đánh bóng một vòng theo kích thước của tấm trượt, sử dụng quả bóng rửa tai nhẹ nhàng thổi các mảnh vụn, lặp lại thao tác này cho đến khi phạm vi đánh bóng hoàn toàn phù hợp với kích thước của tấm trượt, sau đó điều chỉnh tốc độ quay đến trung bình và cao cấp, tiếp tục đánh bóng.

3. Khi xương sọ xuất hiện vết nứt, điều chỉnh tốc độ quay của khoan xương sọ xuống mức thấp, tiếp tục mài, lặp lại thao tác cho đến khi toàn bộ cửa sổ hộp sọ bị gãy hoàn toàn.

4. Cầm nhíp tinh tế, từ từ mở hộp sọ ra.

　　Phần 06Chọn vụn xương

Dùng nhíp tinh tế hạ kim từ bên cạnh cửa sổ sọ, nhẹ nhàng lấy mảnh xương vụn xung quanh ra, lặp lại thao tác này cho đến khi xung quanh cửa sổ sọ hoàn toàn không có mảnh vỡ.

Phần 07Cài đặt Slides

1. Sử dụng nhíp tinh tế để nhẹ nhàng đặt miếng trượt đã rửa lên các mô não tiếp xúc; Nhẹ nhàng nhấn thanh trượt bằng nhíp để nó phù hợp chặt chẽ với bề mặt hộp sọ được đánh bóng và nhúng bên dưới hộp sọ; Kiểm tra dưới kính hiển vi asana xem có bong bóng khí dưới slide hay không, nếu có bong bóng, sau khi mở slide ra, nhỏ giọt thêm nước muối sinh lý, lặp lại thao tác này cho đến khi không còn bong bóng khí.

2. Sử dụng đầu giấy hút ẩm để hút chất lỏng dư thừa rỉ ra ngoài slide, sử dụng quả bóng rửa tai để nhẹ nhàng thổi khô bề mặt hộp sọ, theo thứ tự từ ngoài vào trong, nhúng một lượng nhỏ keo mô sinh học bằng bàn chải lông nhỏ, bôi lên da rìa, toàn bộ hộp sọ và cạnh cửa sổ sọ.

3. Chờ keo mô sinh học khô, nhúng keo 406 bằng que bôi nha khoa, phạm vi áp dụng như trên, chờ keo 406 khô.

4. Dùng đầu giấy hút ẩm chấm hỗn hợp 502 và xi măng nha khoa, một lượng nhỏ bôi lên mép cửa sổ sọ nhiều lần, trong toàn bộ quá trình vận hành phải tránh để keo chảy vào giữa cầu trượt.

Phần 08Cài đặt phần đầu

1. Sử dụng keo 502 để hòa tan xi măng nha khoa trộn đều, phủ một lớp mỏng và đồng nhất của hộp sọ tiếp xúc, đóng hoàn toàn hộp sọ tiếp xúc và lắp đặt phần đầu khi xi măng nha khoa chưa khô.

2. Dùng xi măng nha khoa lấp đầy khoảng trống hoặc điểm yếu kết nối với phần đầu, tăng cường tính vững chắc của phần đầu.

3. Chờ xi măng nha khoa khô ráo, cho chuột vào hộp giữ nhiệt, chờ chuột tỉnh lại.

Phần 09Chăm sóc hậu phẫu

1. Cung cấp điều kiện sống tốt cho động vật, nên nuôi lồng đơn và rắc thức ăn vào lồng để tránh va chạm vào đầu khi động vật ăn hoặc chiến đấu, dẫn đến trường nhìn bị lệch hoặc đầu rơi.

2. Tiêm dung dịch natri ceftriaxone vào khoang bụng của động vật 1-7 ngày sau khi phẫu thuật.